【摘 要】
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目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)硫代反义寡核苷酸抑制人肝癌细胞株增殖的作用。方法:将EGFR反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721,观察瘤细胞体内外增殖的变化。体外实验:取对
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目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)硫代反义寡核苷酸抑制人肝癌细胞株增殖的作用。方法:将EGFR反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721,观察瘤细胞体内外增殖的变化。体外实验:取对数生长期SMMC-7721细胞(2×104 个/0.2ml)接种于96孔培养板,空白对照组加入RPMI1640培养液(10%小牛血清),阴性对照组加入无关寡核苷酸液(10μmol/L),在实验组加入反义寡核苷酸液(10μmol/L)作为干预措施,分别培养24、48、72小时后,加入MTT测定各组吸光值(OD值),计算寡核苷酸对SMMC-7721细胞生长增殖的抑制率。动物实验:常规收集对数生长期SMMC-7721细胞,空白对照组、阴性对照组、实验组分别用无血清RPMI1640培养液、无关寡核苷酸液(30μmol/L),反义寡核苷酸液(30μmol/L)吹打成单细胞悬液,三组细胞浓度均为2×106个/0.2ml,将单细胞悬液接种于Balb/C、nu/nu裸鼠背侧皮下,每组7只裸鼠,观测裸鼠成瘤情况。结果:体外实验:在24小时时段内,实验组与空白对照组OD值差异有显著性(p<0.05),而实验组与阴性对照组OD值差异无显著性(p>0.05);在48、72小时时段内,实验组与空白对照组、阴性对照组OD值差异有显著性(p<0.05);在各时间段内阴性对照组与空白对照组OD值差异无显著性(p>0.05)。24、48、72小时后,反义寡核苷酸对SMMC-7721细胞的增殖抑制率分别为8%、32%、34%。动物实验:SMMC-7721细胞接种裸鼠2月后,空白对照组7只裸鼠均成瘤,阴性对照组7只裸鼠6只成瘤,实验组7只裸鼠仅1只成瘤,实验组与空白对照组、阴性对照组成瘤率差异有显著性(p<0.05)。结论:表皮生长因子受体硫代反义寡核苷酸能特异性地抑制肝癌细胞株SMMC-7721的体内外生长增殖。
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