禽腺病毒（Fowl adevenovirus,FAdVs）属于腺病毒科、禽腺病毒属,是危害家禽养殖业的一类重要传染病病原。FAdVs在世界各地广泛流行,主要表现为心包积液（Hydropericardium syndrome,HPS）、包涵体肝炎、肌胃糜烂等临床症状。尤其是2015年以来,新型FAdV-4感染引起的HPS在我国大部分家禽密集养殖省份突发流行,给我国家禽养殖业带来了严重的经济损失。简便、快捷的FAdVs抗原、抗体诊断方法对于疾病的预防和针对性防控至关重要。本实验室一直对我国FAdVs流行情况进行初步调查,前期分离鉴定了我国流行FAdV-4新基因型毒株HLJFAd15,完成了全基因组测序及致病性研究。在前期研究基础上,本研究制备了HLJFAd15Hexon L1区域的单抗并完成了表位鉴定;同时利用HLJFAd15毒株的纯化病毒粒子建立了FAdV-I通用ELISA抗体检测方法。FAdVs病原学检测方法目前主要依赖PCR和DNA测序,为进一步开发FAdVs抗原快速检测方法,本研究制备了FAdV-4 Hexon L1区域（230个氨基酸）的单抗10株,通过截短表达的方式对5株单抗进行了表位分析,最终鉴定了3个B细胞抗原识别表位(⁷⁹KISGVFPNP⁸⁷、¹⁸¹DYDDYNIGTT¹⁹⁰和³¹PLAPKESMFN⁴⁰)。利用生物信息学工具以及IFA验证分析,⁷⁹KISGVFPNP⁸⁷和¹⁸¹DYDDYNIGTT¹⁹⁰是FAdV-C特异性B细胞抗原表位,³¹PLAPKESMFN⁴⁰是FAdV-I通用B细胞抗原识别表位。本研究成功制备了10株FAdVs单抗,筛选到FAdV-C特异性单抗2株,FAdV-I通用单抗1株,为进一步开发FAdVs抗原检测方法和鉴别诊断试剂开发奠定了基础。ELISA方法具备敏感性高、特异性强、检测快速等优点,已经广泛应用于血清流行病学调查和疫苗评估。目前世界各地已经报道了多种致病性FAdVs,但国内尚没有FAdV-I通用ELISA抗体检测试剂盒。利用FAdVs不同血清型之间良好的交叉反应,本研究纯化了HLJFAd15病毒粒子,建立了FAdV-I通用的间接ELISA抗体检测方法。特异性实验结果显示本研究建立的间接ELISA抗体检测方法与FAdV-III及其他外源病毒均无交叉反应,可以成功检测FAdV-I中FAdV-1、FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-9、FAdV-10、FAdV-11阳性血清。相比FAdV-1作为包被抗原建立的ELISA方法,本研究建立的ELISA方法对我国流行新型FAdV-4血清抗体具有更高的敏感性。本研究成功建立了一种FAdV-I通用的特异性好、敏感性高的间接ELISA抗体检测方法,为FAdVs血清流行病学调查及疫苗的研发、评估提供了有力工具。