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目的:研究吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在NK细胞中是否表达,体外实验初步探索IDO在子宫内膜基质细胞和NK细胞交互对话中可能通过何种机制影响NK细胞的活性。
方法:流式细胞术用于分析IDO在子宫内膜异位症和非子宫内膜异位症患者腹腔液NK细胞中表达的差异,以及IDO+NK细胞和IDO-NK细胞在表型和功能方面的差异。建立子宫内膜基质细胞(ESCs)和NK细胞共培养体系模拟内异灶在腹腔中的微环境,最后用细胞计数盒(CCK-8)分析ESCs的活力。
结果:IDO在子宫内膜异位症患者腹腔液的NK细胞中异常高表达。IDO+NK细胞相较于IDO-NK细胞,低表达NKp46和NKG2D而高表达IL-10。体外实验中,与外周血NK细胞共培养的正常子宫内膜基质细胞(nESCs)或异位子宫内膜基质细胞(eESCs)均上调了NK细胞中IDO的表达,尤其是eESCs,而加入TGF-β中和性抗体则可以抑制IDO表达的上调。将与ESCs共培养后的NK细胞分别与ESCs再次共培养后发现,与eESCs相比,nESCs的活力明显被抑制。同时,若用IDO的抑制剂——1-甲基-色氨酸(1-MT)预处理共培养体系中的NK细胞,则可以恢复其杀伤eESCs的活力。
结论:IDO在内异症患者腹腔液NK细胞中异常高表达,eESCs可能通过TGF-β诱导IDO+NK细胞的分化,IDO+NK细胞杀伤异位子宫内膜组织的毒性减弱,为内异症的免疫治疗提供了新思路,尤其对腹腔中存在大量功能受损的IDO+NK的患者。
方法:流式细胞术用于分析IDO在子宫内膜异位症和非子宫内膜异位症患者腹腔液NK细胞中表达的差异,以及IDO+NK细胞和IDO-NK细胞在表型和功能方面的差异。建立子宫内膜基质细胞(ESCs)和NK细胞共培养体系模拟内异灶在腹腔中的微环境,最后用细胞计数盒(CCK-8)分析ESCs的活力。
结果:IDO在子宫内膜异位症患者腹腔液的NK细胞中异常高表达。IDO+NK细胞相较于IDO-NK细胞,低表达NKp46和NKG2D而高表达IL-10。体外实验中,与外周血NK细胞共培养的正常子宫内膜基质细胞(nESCs)或异位子宫内膜基质细胞(eESCs)均上调了NK细胞中IDO的表达,尤其是eESCs,而加入TGF-β中和性抗体则可以抑制IDO表达的上调。将与ESCs共培养后的NK细胞分别与ESCs再次共培养后发现,与eESCs相比,nESCs的活力明显被抑制。同时,若用IDO的抑制剂——1-甲基-色氨酸(1-MT)预处理共培养体系中的NK细胞,则可以恢复其杀伤eESCs的活力。
结论:IDO在内异症患者腹腔液NK细胞中异常高表达,eESCs可能通过TGF-β诱导IDO+NK细胞的分化,IDO+NK细胞杀伤异位子宫内膜组织的毒性减弱,为内异症的免疫治疗提供了新思路,尤其对腹腔中存在大量功能受损的IDO+NK的患者。