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背景:利奈唑胺是一种新型恶唑烷酮类抗生素,常用来治疗多重耐药的革兰阳性菌感染。美国和中国分别在2000年和2007年引入使用,它被认为是治疗VRE、MRSA和青霉素耐药的肺炎链球菌引起感染的有效药剂。近年来,利奈唑胺耐药的葡萄球菌和肠球菌在多个国家出现,给临床治疗带来了挑战。方法:对北京协和医院2015-2017年间75份病历(包括15例LNSE患者病例和60例LSE的患者病例)及2012-2017年分离出16株LNSE(14株粪肠球菌、1株屎肠球菌和1株铅黄肠球菌)和56株LSE进行分析。对前者运用卡方检验及T检验分析临床资料的差异性。后者在准确鉴定菌株的基础上,检测15种抗菌药物的最小抑菌浓度。对纳入菌株进行分子分型,进而进行聚类及同源性分析。在耐药机制方面对耐药相关基因及毒力基因进行PCR扩增测序。对4株临床分离粪肠球菌进行利奈唑胺诱导耐药实验并检测23S rRNA编码基因位点突变情况。对14株临床分离的LREfs进行接合实验,分析耐药基因在菌株间的传递情况。结果:在LNSE和LSE两组中年龄、住院天数、侵入性操作、患者基础情况、利奈唑胺的使用等因素无统计学差异。分离的16株LNSE多来自妇科(25%,4/16)和外科(25%,4/16)。标本类型主要为尿液(4/16)、引流液(4/16)和血液(2/16)。大部分菌株利奈唑胺MIC为8μg/ml,氯霉素非敏感率为100%,此外耐药率较高的有四环素、氯霉素、左氧氟沙星和红霉素,分别为100%、94.8%、62.5%和62.5%。万古霉素、替考拉宁、氨苄西林、替加环素、呋喃妥因、达托霉素都有较高的敏感性,分别为93.8%、93.8%、87.5%、100%、93.8%和 100%。optrA、fexA、erm 基因仅在耐药菌中为阳性,阳性率分别为100%、100%和35.7%。PFGE对菌株同源性分析具有更高的分辨率,以80%相似度为标准时与MLST有较好的一致性。临床分离的LRE中只有两株检测出G2237A位突变,其他突变未见。cfr阴性,核糖体蛋白L3和L4氨基酸水平也没有改变,optrA基因均为阳性,其蛋白具有5种不同型别,分别为OptrAE349、KD、RDK、EDM和D。诱导耐药试验说明optrA基因阴性的菌株在长时间药物诱导后主要出现G2576T突变,也存在C2610T突变,optrA基因阳性的菌株则未见G2576T突变,出现的突变为G2237A和G2504A。optrA基因定位在细菌的质粒上,接合成功率为 50%(7/14)。结论:本研究中利奈唑胺使用史不是耐药产生的危险因素,利奈唑胺非敏感肠球菌的耐药机制有点突变和optrA,optrA为主要耐药机制且可在不同菌株之间传播。