NeuroD/BETA2蛋白活体转导及其降血糖作用的研究

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本文对NeuroD/BETA2蛋白活体转导及其降血糖作用进行了研究。结果表明:NeuroD/BETA2.EGFP融合蛋白在体外能够高效进入小鼠肠道内分泌肿瘤细胞系STC-1细胞中。MTT实验结果表明原核表达NeuroD/BETA2-EGFP融合蛋白对细胞无毒害作用。NeuroD/BETA2-EGFP尾静脉注射入小鼠体内后能够进入并聚集在小鼠小肠组织中。小肠组织冰冻切片用DAPI染核后通过荧光显微镜观察,发现NeuroD/BETA2蛋白能够进入到肠上皮细胞的细胞核内。对小鼠小肠总RNA进行RT-PCR,real-time荧光定量PCR检测,结果表明注射NeuroD-EGFP蛋白16小时后能够诱导小肠组织异位表达胰岛素,与对照组相比insulin基因转录水平有38倍的提高。免疫组化结果表明注射NeuroD/BETA2蛋白16 小时后,糖尿病小鼠的小肠肠腺以及肠绒毛突起之间的上皮结构中存在表达insulin蛋白的细胞。胰岛素放免实验结果表明注射NeuroD.EGFP蛋白后,糖尿病小鼠血清中胰岛素的含量显著增高。此外,糖尿病小鼠在注射了NeuroD-EGFP蛋白后其症状有了明显改善,血糖降至正常水平,尿量明显减少,体重有所回升。
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