目的:了解构建组织工程骨和组织工程骨膜过程中,人胚骨膜来源成骨细胞与生物衍生支架材料相互作用的分子生物学机制以及成骨细胞重要基因表达的变化,从基因水平预测骨组织工程代用品的生物安全性及有效性。 方法:选用人胚骨膜来源成骨细胞为种子细胞,接种于经过脱蛋白、脱细胞处理的生物衍生支架材料上,分别培养2、4、6、8和10天。提取总RNA,经过逆转录成cDNA,采用实时定量PCR对目的基因Ⅰ型胶原（Co1I）,骨钙素（osteocalcin,OC）,成骨细胞特异转录因子（Cbfa1）),成骨细胞特异基因（osterix）以及整合素α₅β₁（integrinα₅β₁）进行扩增。在聚苯乙烯培养瓶中单纯培养的成骨细胞作为对照组,在相应时间点进行同样的标本处理。 结果:①组织工程骨和单纯培养的成骨细胞Cbfa1的表达随培养时间逐渐降低,其中2天组与10组,8天组与4、6、10天组比较,P<0.05。组织工程骨膜组在培养中期Cbfa1表达降低,其中2天组与4、6、8天组比较,10天组与4天组及8天组比较,P<0.05。培养末期,组织工程骨Cbfa1表达明显高于生物膜组和对照组,P<0.05。②组织工程骨及单纯培养中Osterix表达的变化与Cbfa1一致。组织工程骨膜中Osterix的表达随着培养时间的延长逐渐升高。培养早期和末期,组织工程骨Osterix的表达均高于对照组,P<0.05。③Co1I在两个实验组的表达随时间均出