本论文共分为两个部分,对狼疮抗凝物(LA)的实验室检测标准化进行了探讨。第一部分完成了基于两个途径的狼疮抗凝物检测方法：改良蝰蛇毒磷脂时间试验(dRWT)和硅凝固时间法(SCT)的性能验证,以及根据ISTH 2009, BCSH 2012和CLSI 2014(H60)三个狼疮抗凝物检测指南,建立APTT(APTT Actin、APTT ActinFSL和APTT- Synthil), dRWT和SCT五种不同LA检测试剂及循环抗凝物指数(ICA)、纠正百分比(%C)、标准化比值(NR)等结果表示方法的参考范围(RI)/Cut-off值,比较不同RI/Cut-off值的敏感性和特异性并评估其临床应用,以期为临床提供可靠的检测结果。目前国内外尚无关于dRWT和SCT性能验证的文献报道。按照CLSI EP5-A2, EP6-A2, EP9-A2文件及《卫生部临床血液学检测常规项目分析质量要求WS/T 406-2012文件》标准,对两种狼疮抗凝物检测方法精密度、携带污染率、样本稳定性、方法学比对及参考范围建立进行全面评估。同时验证了乏血小板血浆中血小板计数和样本稳定性。50例乏血小板血浆中血小板计数为(0-9)×109/L,满足指南<10×109/L要求。两种抗凝物检测方法在四个时间点检测结果间P值>0.05,差异无统计学意义。两种试剂批内精密度为0.79%-2.35%,小于2.50%。dRWT试验批间精密度为2.76%-3.53%,SCT试验批间精密度为6.23%-7.02%。所有检测方法携带污染率绝对值<3.00%。dRWT和SCT标准化比值计算所得RI/Cut-off值分别为1.24和1.16。不同仪器同种方法,和相同仪器不同方法之间比对数据相关良好,相关系数>0.900。两种检测方法标准化比值之间差异无统计学意义,同时两种方法阴阳性判断间差异无统计学意义。dRWT和SCT两种狼疮抗凝物检测方法适用于临床样本检测。三种APTT试剂ICA对LA检测的敏感性均低于55.0%,APTT试剂中,APTT-SS(二氧化硅激活)阳性似然比大于鞣花酸为激活剂的APTT试剂。同样为鞣花酸激活剂的APTT试剂,Actin FSL高于Actin。dRWT三种结果表示方法的敏感性分别为70.3%-93.1%,SCT三种结果表示方法的敏感性分别为55.4%々79.2%。除外APTT-Actin和SCT试剂ICA (RI/Cut-off值为第97.5百分位数),其余试剂的特异性均大于90.0%。以dRWT检测结果1.17～1.50为弱阳性判断标准,两种以鞣花酸为激活剂的APTT试剂敏感性均低于16.0%,dRWT以第97.5百分位数为RI/Cut-off值的敏感性最高为71.2%。APTT-SS在各疾病组中均具有较高阳性率,dRWT标准化比值及其组合在抗磷脂综合征(APS)中阳性率最高。APTT-SS和1：1混合试验在凝血因子缺乏(FD)中阳性率分别为92.5%和7.5%。SCT在FD、口服抗凝剂(OAT)和健康人群(HS)中阳性率为0。传统的筛选试验-1：1混合试验-确证试验和标准化比值均与血栓形成相关,比值比(OR)值在4.400-5.667之间。dRWT和SCT标准化比值与血栓形成OR值大于其他试验流程。1：1混合试验因为稀释效应对弱阳性LA检测能力不足,但能有效区分APTT延长是否由凝血因子缺乏导致。筛选试验-1：1混合试验-确证试验和标准化比值均与APS患者血栓形成相关。本次研究结果显示,dRWT标准化比值具有最佳临床诊断效能。同时,LA检测结果的解释需同时考虑患者分析前因素。本研究的第二部分旨在调查血栓与止血特殊检测项目狼疮抗凝物(LA)、蛋白S(PS)、蛋白C(PC)、抗凝血酶(AT)和血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)的生物学变异。采集25例健康成年人(男性13例,女性12例,年龄25-40岁)在研究第1天,第3天和第5天的8：00、12：00和16：00共9个时间点采集枸橼酸盐抗凝静脉血,同时收集健康成年人正常血浆,分别检测上述5个项目。LA结果以dRWT筛选(秒),dRVVT筛选比率(R)和标准化dRVVT比率(NR)三种形式表示。计算分析变异(CVA),个体内变异(CVw)和个体间变异(CVG),分析一天内和一周内各采血时间点结果是否存在差异,并计算个体指数(II)及参考范围变化值(RCV)。PS, PC, AT-Ⅲ, vWF:Ag, dRWT筛选(秒),dRWT筛选比率(R)和标准化dRWT比率(NR)的CVA均小于1/2CVw, CVw分别为4.59%-7.45%,CVG分别为4.28%-31.71%。vWF:Ag的CVw(5.84%)和CVG(31.71%)略高于文献数据,与受试者人群ABO血型分布有关,进一步强调vWF:Ag应根据血型建立非O型和O型两个参考范围。同一天内不同时间点和天间采血结果间方差分析P值为0.065-0.922(P>0.05),差异无统计学意义。5个项目个体指数(II)结果为0.18～0.71,提示上述5个凝血参数主要用于观察疾病进展或判断预后。本研究首次得出了中国人群PS, PC, AT-Ⅲ, vWF:Ag和LA的生物学变异数据,其中LA生物变异度数据为国内外第一次报道,弥补了数据库的不足。