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研究目的: 本研究将小分子多肽水凝胶载药技术用于化疗药物的制备,合成一种纳米级治疗恶性肿瘤的化疗药物Taxol-SA-YSA,并且在体外细胞实验与体内动物实验中研究该药物对恶性肿瘤细胞的杀伤作用及全身毒性的大小,观察其对恶性肿瘤的治疗效果。 材料与方法: 本研究中的药物由两部分组成,即化疗药物和多肽,化疗药物我们选用临床常用的紫杉醇(Taxol),首先通过Taxol上的羟基与丁二酸酐(SA)反应得到Taxol-SA,然后通过多肽固相合成法将单个氨基酸脱水缩合成一条多肽链 YSA(YSAYPDSVPMMS),最后通过YSA上的氨基与Taxol-SA上的羧基进行偶合反应得到最终产物Taxol-SA-YSA。我们将得到的最终产物通过高效液相色谱仪分离提纯,然后使用电子透射显微镜成像、时间飞行质谱仪、高效液相色谱质谱联用仪、全数字核磁共振波谱仪等对Taxol-SA-YSA的理化性质进行表征,然后我们以YSA、Taxol为对照组,Taxol-SA-YSA为实验组,测定不同的药物浓度下对体外肿瘤细胞4T1的细胞毒性,最后我们将实验组、对照组药物与空白组(生理盐水)以相同的浓度注射于4T1肿瘤模型鼠的肿瘤局部,每隔一天观察并测量小鼠体重及肿瘤体积,16天后处死小鼠并取新鲜肝脏脾脏及肿瘤组织制作石蜡切片,作HE染色与TUNEL染色,观察并比较实验组与对照组药物对肝脾等正常组织及肿瘤的毒性大小,评价Taxol-SA-YSA在恶性肿瘤治疗中的药效及安全性。 实验结果: 本研究最终得出如下结果:我们合成的药物Taxol-SA-YSA具有较高的纯度,并且在一定理化条件下能够形成可注射的水凝胶,电镜下观察到Taxol-SA-YSA分子自组装成纤维状纳米结构。在体外细胞毒性实验中,我们的实验组药物Taxol-SA-YSA展现出比对照组药物更强的肿瘤细胞毒性,且实验组与对照组之间的差异具有统计学意义。在动物实验中,我们发现实验组、对照组及空白组小鼠体重的变化均较小,其组间差异不具有统计学意义。各组小鼠肿瘤体积的变化所呈现的上升趋势为生理盐水组=YSA组>Taxol组>Taxol-SA-YSA组,其差异不具有统计学意义。最后,肝脾及肿瘤组织切片HE染色及TUNEL染色结果充分证明Taxol-SA-YSA药物对肿瘤的抑制效果优于Taxol,且对肝脾等正常组织几乎没有毒性。综合以上结果,我们的药物Taxol-SA-YSA与Taxol相比具有较好的抑制肿瘤的效果,且安全性良好。 研究结论: 抗肿瘤药物Taxol-SA-YSA抑制肿瘤的效果优于化疗药Taxol,并且全身毒副作用较小,可能具有临床应用前景。