草莓炭疽病病原鉴定、生物学特性及药剂毒力测定

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近年来随着上海地区草莓栽培面积的不断扩大,草莓炭疽病的发生和为害日益严重,已经发展成为继灰霉病、白粉病后严重为害草莓产量的第三大病害。从上海市农科院以及上海市郊区采集草莓炭疽病病样,分离得到17个分离物。通过致病性回接试验都能使草莓发病,并且能够从接种发病的草莓植株上重新分离得到该病菌,符合柯赫氏法则,证明它们都是草莓炭疽病的病原菌。通过对这17个草莓炭疽病菌分离物的分生孢子形态、有性态有无的观察以及核糖体DNA的ITS序列同源性比对等多方面的病原菌鉴定后得出结论:17个草莓炭疽病菌菌株中有16个被鉴定为Colletotrichum gloeosporioides,所占比例达到94%,而仅仅一个菌株被鉴定为是Colletotrichum acutatum。C. gloeosporioides在PSA培养基上培养菌落呈青灰色、灰白色或灰黑色的地毯状,分生孢子单孢、无色、呈两头钝圆的棍棒型,大小为13.0~19.7×4.1~7.3μm,平均15.2~17.4×5.1~5.8μm,其中11个菌株在PSA上被观察到了有性态的产生。而C. acutatum在PSA上的菌落呈粉红色的绒毛状,分生孢子单孢、无色、梭形,大小为12.1~16.4×3.6~5.4,平均14.3×4.5μm,未观察到有有性态的出现。生物学特性研究结果表明,光照对病菌菌丝的生长和产孢产生明显的影响,QPg-961在PSA培养基上经连续光照(3 000 lx日光灯)、12 h光暗交替、连续黑暗下培养6 d后的菌落直径分别为69.5、66.5、60.5 mm,产孢量分别是1.0×10~6、2.5×10~6、1.8×10~7个/皿。CMf-04在PSA培养基上经连续光照(3 000 lx日光灯)、12 h光暗交替、连续黑暗下培养6 d后的菌落直径分别为41.5、40.3、31.2 mm,产孢量分别是2.8×10~7、6.8×10~7、7.3×10~7个/皿。在孢子萌发初期,黑暗条件更有利于两个病菌分生孢子的萌发。QPg-961能够生长的温度范围是10~36℃,最适温度为28℃,当温度低于10℃或高于36℃时就很难甚至停止生长;分生孢子在20~28℃时比较容易产生,26℃时产孢量最多,当温度低于16℃时或高于30℃时就难以产生;12~34℃的范围内,病菌的分生孢子萌发率很高,但当温度低于10℃或高于36℃时,分生孢子的萌发就明显受到了抑制;菌丝的生长对pH值的要求不高,但pH5时更有利于菌丝的生长;pH5~6的偏酸性条件下更有利于病菌分生孢子的产生,碱性条件能明显地抑制其分生孢子的产生;供试的7种碳源中,葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、D-果糖均有利于病菌菌丝的生长,而乳糖、甘露醇、淀粉都不利于病菌的生长;麦芽糖最有利于分生孢子的产生;供试的7种氮源中,蛋白胨最有利于菌丝的生长,酵母膏、蛋白胨和牛肉浸膏有利于分生孢子的形成。CMf-04的菌丝能够生长的温度范围是10~32℃,最适温度为24℃,当温度低于10℃或高于32℃时就很难甚至停止生长;分生孢子在24~30℃时比较容易产生,26℃时产孢量最多,当温度低于20℃时或高于32℃时就难以产生;12~32℃的范围内,病菌的分生孢子萌发率很高,但当温度低于10℃或高于34℃时,分生孢子的萌发就明显受到了抑制;菌丝的生长对pH值的要求不高,但pH5时更有利于菌丝的生长;pH8~10的偏碱性条件下更有利于病菌分生孢子的产生,酸性条件下不利于分生孢子的产生;供试的7种碳源中,葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、D-果糖均有利于病菌菌丝的生长,而乳糖、甘露醇、淀粉都不利于病菌的生长;D-果糖最有利于分生孢子的产生;供试的7种氮源中,酵母膏、蛋白胨和牛肉浸膏这三种有机氮源更有利于菌丝的生长和分生孢子的形成。室内药剂筛选试验结果表明,在对QPg-961测试的7种药剂中,世高和敌力脱的抑菌效果最好,EC50分别为0.024μg/mL和0.19μg/mL,其次为达科宁和炭特灵,EC50分别为36.45μg/mL、14.85μg/mL,而多菌灵、丹菌克和阿米西达的效果不好,EC50分别达到1229.99μg/mL、213.16μg/mL和169.79μg/mL。7种杀菌剂对QPg-961的毒力大小次序为:世高>敌力脱>碳特灵>达科宁>阿米西达>丹菌克>多菌灵。在对CMf-04测试的7种药剂中,世高、多菌灵和敌力脱的抑菌效果最好,EC50分别为0.021μg/mL、0.53μg/mL和0.22μg/mL,其次为阿米西达和炭特灵,EC50分别为3.31μg/mL、23.38μg/mL,而达科宁和丹菌克的效果不好,EC50分别达到138.68μg/mL和1258.93μg/mL。7种杀菌剂对CMf-04的毒力大小次序为:世高>敌力脱>多菌灵>阿米西达>碳特灵>达科宁>丹菌克。通过本文的研究,明确了上海郊区夏季草莓繁苗期间发生危害的草莓炭疽病病原种类主要为C. gloeosporioides。通过生物学特性、药剂筛选等研究明确了两种病菌之间存在显著差异,为上海及我国其他地区草莓炭疽病的防治及抗病育种提供了技术上的支持。
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