食品蛋白质快速检测光学传感器试条研究

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本研究针对目前市场上食品中蛋白质(BSA)难以现场化检测的问题,基于化学显色反应原理和干化学分析技术,于实验室内制备出蛋白质光学传感器试条,实现了对食品中蛋白质的快速检测。试验中选用考马斯亮蓝-G250、溴酚蓝、4-喹啉甲酸(BCA)三种试剂作为蛋白质的显色剂,采用紫外分光光度法对上述三种试剂进行优化研究。通过光谱扫描,时间扫描和定量测定,结果显示,溴酚蓝作为蛋白质的显色剂具有快速、灵敏度高等特点,因此,实验中确定溴酚蓝为蛋白质的的显色试剂。同时基于分光光度法对溴酚蓝检测蛋白质进行了实验研究,结果表明,溴酚蓝最适用量为50μL,最适pH为2.8-4.6,最佳反应时间为2min,在蛋白质浓度为5~100μg/mL的范围内具有良好的线性关系,相关系数R=0.9955。并对其做了干扰试验,结果表明硫酸铵、甘氨酸、三聚氰胺均对溴酚蓝的检测结果无干扰。经过合理设计,利用过滤膜、反应膜、基板制成了用于测定蛋白质浓度的光学传感器试条。基于便携式测色仪,对蛋白质试样进行了测定研究。试验中首先对反应膜浸泡时间、加样量、反应时间进行了优化研究,旨在最短的时间及最节省试剂的情况下达到检测蛋白质的目的。经过一系列优化实验,确定了试条反应膜的最佳浸泡时间为60s,最佳加样量为120μL,最佳反应时间为4.5min。在此基础上,利用制作的试条对不同浓度的蛋白进行检测,实验结果表明,蛋白质的浓度在25~1000μg/mL范围内时,b值随着蛋白质浓度的增大而增大,b值与蛋白质的浓度高度相关,且具有良好的线性关系,其线性回归方程y=0.002x+2.9948,相关系数R=0.9927。后期对试条的保存温度、保存湿度和保存期进行了试验,结果表明,试条的最适保存温度为25℃,最佳保存湿度为50%,保存期为2个月。由此可见,利用光学传感器试条检测蛋白质,试条制作简单,操作简便、快速、灵敏度高、干扰物少,适合食品中蛋白质的测定。
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