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目的：观察bcl-2与c-erbB-2基因反义寡核苷酸联合转染对人鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）细胞株HNE-1细胞增殖的影响。方法：人工合成并经全硫代磷酸化修饰的bcl-2与c-erbB-2基因反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide，ASODN）与脂质体（lipofectin,Lip）混合制备成复合物处理人鼻咽癌细胞株HNE-1,并把实验分为七组：（Ⅰ）正常对照组、（Ⅱ）c-erbB-2正义寡核苷酸+脂质体组、（Ⅲ）bcl-2正义寡核苷酸+脂质体组、（Ⅳ）c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体组、（Ⅴ）bcl-2反义寡核苷酸+脂质体组、（Ⅵ）bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（全剂量）联合组和（Ⅶ）bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（半剂量）联合组。利用流式细胞仪检测各实验组的细胞周期以及bcl-2与c-erbB-2蛋白表达；利用电子显微镜镜观察各实验组细胞形态学改变；利用MTT试验与克隆（集落）形成试验观察各实验组细胞增殖情况。 结果：实验组与对照组比较，S期(DNA合成期)有逐渐延长的趋势，其中bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（半剂量）联合组最为明显。从细胞形态学观察：反义治疗组观察到线粒体肿胀、凋亡等现象，而bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（半剂量）联合组最为典型。MTT试验与克隆（集落）形成试验观察到反义治疗组与其它组细胞增殖抑制率有显著差异（p﹤0.05）,而bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（半剂量）联合组(增殖抑制率达到了90.12%)与其它组细胞增殖抑制率有极显著差异（p﹤0.01）。流式细胞仪检测各实验组的bcl-2与c-erbB-2蛋白表达发现反义治疗组较其它组明显下调，而bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（半剂量）联合组bcl-2与c-erbB-2蛋白表达与其它组有极显著差异（p﹤0.01）。结论：bcl-2与c-erbB-2基因反义寡核苷酸转染对人鼻咽癌细胞株HNE-1细胞增殖有抑制作用，并能下调bcl-2与c-erbB-2蛋白表达，而联<WP=9>合转染的增殖抑制作用更为明显。关键词：鼻咽癌， 基因， 反义寡核苷酸， 联合转染第二部分目的：观察bcl-2与c-erbB-2基因反义寡核苷酸联合转染对顺铂（cisplatin,DDP）诱导的鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）细胞株HNE-1细胞凋亡的影响。 方法：人工合成并经全硫代磷酸化修饰的bcl-2与c-erbB-2基因反义寡核苷酸 （antisense oligodeoxynucleotide，ASODN）与脂质体（lipofectin, Lip）混合制备成复合物处理人鼻咽癌细胞株HNE-1,并把实验分为八组：（Ⅰ）空白对照组、（Ⅱ）脂质体+DDP、（Ⅲ）c-erbB-2正义寡核苷酸+脂质体组+DDP、（Ⅳ）bcl-2正义寡核苷酸+脂质体组+DDP、（Ⅴ）c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体组+DDP、（Ⅵ）bcl-2反义寡核苷酸+脂质体组+DDP、（Ⅶ）bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（全剂量）联合+DDP组和（Ⅷ）bcl-2反义寡核苷酸与c-erbB-2反义寡核苷酸+脂质体（半剂量）+DDP联合组。利用流式细胞仪检测各实验组bcl-2与c-erbB-2蛋白表达；利用电子显微镜镜观察各实验组细胞形态学改变；利用末端脱氧核苷转移酶（Tdt）介导的脱氧尿苷三磷酸（dUTP）末端标记法（TUNEL）原位观察细胞凋亡，并计算平均凋亡指数（AI）。 结果：流式细胞仪检测各实验组的bcl-2与c-erbB-2蛋白表达发现反义治疗组较其它组明显下调。电子显微镜观察发现反义治疗组出现以下改变：胞浆内脂滴较多，出现髓样结构，线粒体肿胀崩解，溶酶体大量出现；细胞核内染色质边集、可见脂滴、空泡化改变；细胞核的固缩变形，凋亡小体和凋亡细胞清晰典型。TUNEL检测发现：第2、3、4组凋亡指数(AI)无明显差异（p>0.05）, 第5~8组较1~4组AI有极显著差异（P<0.01）,其中第8组凋亡指数明显高于其余各组（P<0.01）。结论：bcl-2与c-erbB-2反义寡核苷酸联合转染能促进顺铂诱导的鼻咽癌细胞凋亡，表明鼻咽癌的综合治疗、基因治疗并不排斥其它治疗手段。