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背景及目的:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,是一个发病率高、预后极差,严重危害人类身体健康的一个疾病,乙型和丙型肝炎病毒感染、环境因素以及遗传易感性是肝癌发生的主要背景因素,其中,乙型肝炎病毒感染(Hepatitis B virus,HBV)是肝细胞癌发生发展的一个主要危险因素。在我国,HBV基因型主要为B型和C型,南方以B型为主,北方则以C型为主,山东地区也以C型为主。目前的研究证明,HBV基因型C型比B型更容易引起活动性肝炎等肝脏疾病以及更容易引起肝细胞癌的发生。大量的研究表明,HBV X基因在HBV相关HCC的发生过程中发挥着极为关键的作用。HBx在乙型肝炎病毒整合入宿主细胞的过程中发挥着重要的作用,同时它又是一种具有反式激活功能的蛋白质,在调节基因转录、细胞信号转到、控制癌基因以及抑癌基因的活性方面都具有重要的作用。流行病学调查表明,在人类肝细胞癌患者中经常发生HBX基因的突变和缺失,增强了其反式激活的功能,与肝细胞癌的发生密切相关。有报道发现HBx基因1485位胞嘧啶(C)变为胸腺嘧啶(T)在肝细胞癌患者中有较高的发生率,但目前的研究尚存在争议,且在我国还没有对此位点变异的相关研究和报道,故本研究我国C基因型乙肝病毒X基因1485位点的变异与肝细胞癌发生的关系以及乙肝相关性肝细胞癌发生的危险因素分析。方法:1、本研究收集了2007年9月到2008年9月在济南市传染病医院住院的90例乙肝相关性肝细胞癌患者以及90例慢乙肝、乙型肝炎肝硬化患者的血清和病例资料,其均为HBV基因型C型,检测患者肝功、生化、血常规、HBV DNA,乙肝血清学标志等指标。应用乙肝病毒PCR扩增提取试剂盒按照说明流程从血清中提取HBVDNA。设计引物,扩增HBx基因,用PCR限制性片段多态性分析(Polymerase chainreaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测乙肝病毒X基因1485位的变异情况,并选择部分部分PCR扩增产物用PCR纯化试剂盒提纯,利用基因测序技术验证其结果,以确保实验的准确性。2、采用SPSS13.0软件录入数据并进行统计学分析。计量资料采用t检验、Mann-Whitney检验;计数资料的分析采用Chi-square检验。用多因素Logistic回归分析HBV相关肝细胞癌发生的危险因素。P＜0.05为差异有统计学意义。结果:HBx基因第1485位点的变异在90例肝细胞癌患者中发现有43例(48%),90例慢乙肝、乙肝肝硬化患者中发现有13例(14.4%),两者差异有统计学意义(P＜0.0001)。经过统计分析发现肝细胞癌患者合并肝硬化的比例高于慢肝患者,然而e抗原阳性率、血清白蛋白水平以及血小板计数均低于慢肝患者。多因素Logistic回归分析显示C1485T的改变、肝硬化的发生、e抗原阴性、年龄大于50岁以及AFP＞400ng/ml是肝细胞癌发生的危险因素。结论:C基因型乙肝病毒X基因C1485T变异是肝细胞癌发生的一个独立的危险因素,或许能作为HBV感染患者临床结局的一个可预测性分子标记。