本课题从理论探讨和科学研究两部分探讨2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM）轻度认知功能障碍（mild cognitive impairment,MCI）与性激素信号通路之间的相关性。第一部分理论探讨从中医学理论及现代医学研究出发,结合导师观点和自身科学研究,对T2DM MCI（消渴呆病）的病因病机、辨证论治等进行简要阐述。第二部分科学研究目的:研究2型糖尿病轻度认知功能障碍小鼠性激素和大脑海马及皮质中ChAT、ApoE、Aβ_1-42的变化和表达水平,进一步探索补肾醒脑法对2型糖尿病小鼠学习记忆能力的影响及可能作用机制,为阐释“胰（脾）-脑-肾轴”消渴呆病病机学说提供新的科学依据。方法:由中国医学科学院实验动物研究所提供的10周龄健康清洁级雄性昆明小鼠为正常对照组;10周龄健康SPF级（specific pathogen free,无特定病原体级）雌性KKay小鼠为实验组。KKay小鼠以高糖高脂饲料喂养6周后,断尾取血法检测空腹血糖≥13.9mmol/L并稳定后随机分为模型对照组、阳性对照组、中药组和中药手术组。阳性对照组每日用马来酸罗格列酮片(按照0.003g·kg^-1小鼠体重)和吡拉西坦片(按照150mg·kg^-1小鼠体重)灌胃给药,中药组和中药手术组每日分别用马来酸罗格列酮片(按照0.003g·kg^-1小鼠体重)和醒脑益智剂生药(按照7.2g·kg^-1小鼠体重)灌胃给药,正常对照组和模型对照组每日用等体积无菌生理盐水灌胃给药,连续8周,每周检测一次实验动物的体重和血糖。在给药前和给药结束后分别各进行一次Morris水迷宫实验,记录实验结果并做统计和比较。第二次水迷宫实验结束后,及时于冰上进行实验动物解剖及样本制备。采用酶联免疫分析法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组小鼠相关性激素水平;实时荧光定量（QPCR）检测小鼠大脑皮质及海马中ChAT、ApoE mRNA表达水平;免疫蛋白印迹法（Western Blotting）检测实验小鼠大脑皮质及海马中β-淀粉样多肽(Aβ_1-42)水平。结果:1.各组实验动物的一般状态及情况:正常对照组实验动物状态均较为良好,毛色亮白而略有光泽,均正常摄食饮水、日常行动灵敏活跃。模型对照组、阳性对照组、中药组和中药手术组的2型糖尿病KKAy小鼠均随着周龄增长而逐渐出现了不同程度的倦怠、毛色枯涩、反应迟钝、精神萎糜、多食多尿、行动缓慢等表现,尤其以模型对照组表现最为明显。2.Morris水迷宫动物行为学实验测试结果（1）给药前第5天结果显示,与正常对照组相比较,模型对照组、阳性对照组、中药组和中药手术组潜伏期明显偏高,站台象限概率明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与中药手术组相比较,其他各组KKAy动物模型小鼠潜伏期明显偏低,差异有统计学意义（P<0.05）;（2）与给药前第5天结果相比较,给药后第5天阳性对照组和中药组潜伏期均明显降低,中药组站台象限概率均明显升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;中药手术组潜伏期有一定程度的降低,站台象限概率有一定程度的升高,但差异均没有统计学意义（P>0.05）;（3）给药后第5天结果显示,与正常对照组相比较,模型对照组、阳性对照组、中药组和中药手术组潜伏期明显偏高,模型对照组、阳性对照组和中药手术组站台象限概率明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型对照组相比较,正常对照组、中药组、阳性对照组第5天潜伏期明显降低,站台象限概率明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）;与阳性对照组相比较,中药组第5天站台象限概率有一定程度增高,但差异并不明显（P>0.05）;与中药组相比较,中药手术组第5天潜伏期明显升高,站台象限概率明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;3.对血糖和体重的影响（1）血糖给药前及给药后与正常对照组动物相比较,各KKAy实验组实验动物血糖均明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与给药前相比较,阳性对照组、中药组和中药手术组实验动物血糖均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;给药后,与模型对照组相比较,阳性对照组、中药组和中药手术组实验动物血糖均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;其他各组间差异均不明显（P>0.05）;（2）体重给药前及给药后与正常对照组动物相比较,各KKAy模型组小鼠体重均明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与给药前相比较,各实验组小鼠体重均有升高,但差异并不明显,无统计学意义（P>0.05）;4.各组小鼠体内血浆雌激素的变化水平（1）与正常对照组相比,模型对照组和中药手术组血浆雌二醇（E2）水平均明显降低（P<0.05）;与模型对照组相比较,中药组E2水平明显升高（P<0.05）;与阳性对照组相比较,中药组E2水平明显升高（P<0.05）;与中药组相比较,中药手术组E2水平明显偏低（P<0.05）;（2）与正常对照组相比,模型对照组和中药手术组血浆孕酮（P）水平均明显降低（P<0.05）;与模型对照组相比较,中药组P水平明显升高（P<0.05）;与阳性对照组相比较中药手术组P水平明显降低（P<0.05）;与中药组相比较,中药手术组P水平明显偏低（P<0.05）;（3）各组间相比较,血浆睾酮（T）均没有统计学意义（P>0.05）。与正常对照组相比,自发性2型糖尿病KKay小鼠组的血浆T值有一定程度的升高,但并没有明显统计学差异。与模型对照组相比,阳性对照组血浆T有一定程度的升高,中药组及中药手术组小鼠血浆T值有一定程度的降低,但差异均没有明显统计学意义;（4）与正常对照组相比,模型对照组、阳性对照组和中药手术组血浆卵泡刺激素（FSH）水平均明显升高（P<0.05）;与模型对照组相比较,中药组血浆FSH水平明显降低（P<0.05）;与阳性对照组相比较,中药组和中药手术组FSH水平一定程度有所降低,但差异并不明显,无统计学意义（P>0.05）;与中药组相比较,中药手术组FSH水平一定程度有所升高,但差异并不明显,无统计学意义（P>0.05）（5）与正常对照组相比,模型对照组、阳性对照组和中药手术组血浆黄体生成素（LH）水平均明显升高（P<0.05）;与模型对照组相比较,中药组血浆LH水平明显降低（P<0.05）;与阳性对照组相比较,中药组LH水平明显降低（P<0.05）;与中药组相比较,中药手术组LH水平明显升高（P<0.05）;（6）与正常对照组相比,模型对照组、阳性对照组、中药组和中药手术组血浆泌乳素（PRL）水平均明显升高（P<0.05）,差异有统计学意义;与模型对照组相比较,阳性对照组、中药组和中药手术组血浆PRL水平有一定程度的升高,但差异无统计学意义（P>0.05）;其他各组间差异均不明显,无统计学意义（P>0.05）;5.与正常对照组相比,模型对照组和中药手术组实验动物大脑海马内ChAT mRNA表达水平均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型对照组相比较,阳性对照组和中药组实验动物大脑海马内ChAT m RNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与中药组相比较,中药手术组实验动物大脑海马内ChAT mRNA表达水平明显偏低,差异有统计学意义（P<0.05）;6.与正常对照组相比,2型糖尿病KKAy动物模型各组实验动物的大脑海马内ApoE mRNA表达水平均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;但2型糖尿病KKAy动物模型各组间比较均无统计学意义（P>0.05）;7.与正常对照组相比较,各2型糖尿病KKAy动物模型组的大脑海马内Aβ_1-42水平均明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型对照组相比较,阳性对照组、中药组、中药手术组Aβ_1-42蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与阳性对照组相比较,中药组Aβ_1-42蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与中药组相比较,中药手术组Aβ_1-42蛋白表达水平均明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.醒脑益智剂对性激素的影响:18周龄的T2DM小鼠认知功能已经出现了障碍且有明显的性激素紊乱,E2、P降低,而FSH、LH和PRL有所升高的,以E2降低最为明显,T变化不明显。醒脑益智剂能较好的纠正这种性激素水平的紊乱,以提高E2、P,降低LH和FSH为主,并且在T2DM小鼠这种作用中效果优于去势小鼠。2.醒脑益智剂对大脑海马ChAT、ApoE mRNA及Aβ_1-42变化和表达水平的影响:（1）T2DM MCI动物模型存在高水平的Aβ_1-42蛋白表达。醒脑益智剂和吡拉西坦可以有效降低T2DM MCI动物模型的的Aβ_1-42蛋白表达水平,其中醒脑益智剂对壮年的T2DM MCI动物模型改善效果更佳。实验动物大脑海马内Aβ_1-42表达水平可能与血清黄体生成素水平成正比,与血清雌二醇、孕酮水平成反比;（2）T2DM MCI可能是由大脑海马内ChAT mRNA表达水平过度降低引起的,醒脑益智剂和吡拉西坦可以提高其大脑海马内ChAT mRNA表达水平。T2DM MCI小鼠大脑海马内ChAT mRNA表达水平可能与血清雌二醇、孕酮成正比,与血清黄体生成素水平成反比,而性激素的紊乱一定程度上抑制了醒脑益智剂对快速衰老型T2DM MCI小鼠ChAT mRNA表达水平的改善作用,并进一步阻碍了其学习记忆功能的恢复。（3）醒脑益智剂对T2DM MCI小鼠认知功能的影响研究1)KKAy小鼠在18周龄时认知功能明显降低,急速衰老型2型糖尿病小鼠认知功能显著低于正值壮年的小鼠,这种差异可能是由性激素水平异常形成的;2)经吡拉西坦及醒脑益智剂治疗后,2型糖尿病小鼠的认知功能有明显的改善,但仍无法达到正常小鼠的水平;3)经醒脑益智剂干预治疗,快速衰老型2型糖尿病小鼠的学习记忆能力有所改善,但低于正常小鼠及壮年2型糖尿病小鼠,这一差异可能是由于药物无法有效调节紊乱的性激素分泌能力而引起的;4)醒脑益智剂改善2型糖尿病小鼠认知功能障碍可能是通过提高血浆雌二醇、孕酮水平和大脑海马内ChAT mRNA表达水平,降低血浆卵泡刺激素和大脑海马内Aβ_1-42表达水平实现的。