在战场上和在日常事故当中,不受控制的出血是导致死亡的主要原因。因此研究新型止血材料并如何快速有效的止血一直以来都是非常热门的话题。丝素蛋白是一种天然纤维材料,具有人体中必要的数种氨基酸,对机体无毒、无刺激作用,可生物降解;此外丝素蛋白还可以根据需要加工成各种形态的材料,通过不同的化学试剂改性,具有很大的可塑性,广泛应用于纺织行业、生物医药领域。为进一步拓宽蚕丝蛋白生物医药材料领域中的应用,本文主要研究了酶法制备丝素肽的结构与止血性能。首先采用碱性蛋白酶Alcalase、复合风味酶Flavourzyme、复合蛋白酶Protamex和胃蛋白酶Pepsin水解丝素蛋白,在此基础上,采用碱性蛋白酶Alcalase与复合风味酶Flavourzyme(制备的丝素肽用AF表示)、复合蛋白酶Protamex与复合风味酶Flavourzyme(制备的丝素肽用PF表示)的组合来分步酶解丝素蛋白制备6种丝素肽。采用场发射扫描电子显微镜(FESEM)、傅里叶红外光谱仪(FTIR)、X射线衍射仪(XRD)、Zeta电位测试仪等对6种丝素肽的形貌结构和性能进行测试和表征。通过血液粘度实验、血小板粘附实验、体外凝血时间等体外凝血实验对丝素肽的止血性能进行评价,并通过大鼠肝脏止血模型验证其止血效果。最后,为了进一步提升酶解丝素肽止血材料的止血性能,将碱性蛋白酶Alcalase制备的丝素肽与含银的介孔生物玻璃材料按5%,10%,15%,20%的比例共混制备复合止血材料,研究其结构和止血抗菌性能。主要研究结果表明:1、体外血液实验结果和大鼠肝脏止血模型表明,制备的4组丝素肽都有一定的止血效果,且止血效果比市售明胶海绵好,其中Alcalase组丝素肽止血效果最好,Flavourzyme组丝素肽与Protamex组丝素肽止血效果相近,Pepsin组丝素肽止血效果稍差。由于制备的4组丝素肽表面具有孔状形貌,包含无规卷曲结构,使得4组丝素肽具有良好的吸水性能,加速凝血。同时,4组丝素肽带有负电势,能够快速激活凝血酶,缩短凝血时间,促进凝血。2、双酶制备丝素肽的止血效果比单一Flavourzyme制备丝素肽好。由于AF组丝素肽表面有很多均匀细小的孔隙,PF组丝素肽表面的孔隙较大,两组丝素肽以β-折叠为主,包含无规卷曲结构,使得双酶制备丝素肽具有良好的吸水性能并带有更大的负电势,提高血液粘度,促使血小板在丝素肽表面聚集,有利于凝血。3、复合止血材料的止血抗菌性能优于单一Alcalase酶制备丝素肽。加入含银介孔生物玻璃后,复合止血材料表面逐渐变的粗糙,孔隙增多,负电势增大,凝血性能和止血效果都有一定的提升。并随着样品中含银介孔生物玻璃含量的增加,复合止血材料的止血抗菌性能提高。