大豆疫霉菌群体遗传结构研究

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:sheng285292970
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大豆疫霉Phytophthora sojae是一种重要的植物病原菌,由其引起的根腐病是大豆生产上的毁灭性病害之一。1991年在我国黑龙江省发现该病,此后,对我国大豆生产构成严重的威胁。近年的调查表明,大豆疫霉根腐病在我国的黑龙江和福建大豆产区严重发生。目前,种植抗病品种是控制大豆疫霉根腐病最为经济有效的措施,但是,由于病原菌的易变性造成抗病品种的抗性丧失,造成病害大流行,而研究大豆疫霉的群体遗传结构特征有助于了解大豆疫霉的群体遗传结构分子机理。对土壤诱捕方法进行改进,使用青霉素、利福平、五氯硝基苯和多菌灵等药剂控制诱捕大豆疫霉过程中的杂菌污染。应用改良方法对采自中国福建省大豆田的土样进行了大豆疫霉诱捕结果显示,福建省厦门市大豆产区大豆疫霉的分离率为78%,福建省漳州市大豆产区大豆疫霉菌分离率为90%。对土壤中大豆疫霉菌DNA采用CTAB法、脱脂奶粉法、氯化苄法等3种方法提取,并用特异引物PCR扩增进行分析比较,表明:采用脱脂奶粉法提取土壤中大豆疫霉菌DNA效率高、耗时短,步骤简捷。从福建厦门、漳州和黑龙江大豆产区标样采集、土壤诱捕共分离得到的85株大豆疫霉菌,采用生长速率法测定对甲霜灵的敏感性。12.9%的菌株表现为低抗性,87.1%的菌株表现出敏感。EC50值的范围为0.05114~0.25553μg/mL。结果表明:目前从福建和黑龙江采集分离大豆疫霉菌株尚未对甲霜灵产生高抗药性。应用13个鉴别寄主,对来自不同地区的85个大豆疫霉菌分离物进行毒力鉴定,证明我国大豆疫霉菌存在丰富的毒力多样性。能克服抗病基因Rpsla、Rpslb、Rpslc、Rpsld、Rpslk、Rps2、Rps3a、Rps3b、Rps3c、Rps4、Rps5、Rps6和Rps7的菌株出现频率依次为51.7%、40%、34.1%、62.3%、7%、44.7%、55.2%、37.6%、63.5%、70.5%、78.8%、71.7%、83.1%,毒力出现频率在50%以上的为优势毒力,对不同地区来源菌株的毒力组成分析比较表明,漳州地区的优势毒力为1a、1d、2、4、5、6、7,厦门地区的优势毒力为1d、2、3a、3b、4、5、6、7,而黑龙江菌株的优势毒力为1a、1b、1d、2、3b、3c、4、5、6、7。黑龙江省菌株毒力多样性最丰富,其次是厦门地区,而漳州地区菌株的毒力组成相对简单。用SSR和ISSR两种分子标记对来自福建厦门和漳州及黑龙江的85个大豆疫霉菌株进行DNA指纹分析。结果显示。10对SSR引物共扩增出55条条带,其中多态性条带比例为95%,而12条ISSR引物共扩增出68条条带,多态性比例为95.6%。SSR和ISSR分析都表明:在70%的相似性水平上可将85个菌株划分为7个遗传聚类组,中国福建厦门和漳州的遗传相似性最高,而与黑龙江群体的遗传相似性最低。
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