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研究目的:支气管肺发育不良(Bronchopulmonary dysplasia,BPD)是一种常见于早产儿的慢性肺损伤疾病,炎症是造成肺损伤的主要因素之一。近年来研究发现BPD的发生发展可能与肺泡上皮细胞过度凋亡相关。PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten)可以通过调控PI3K/AKT,MAPK等多种细胞内信号转导通路,诱导细胞周期阻滞及凋亡,抑制细胞生长,其表达变化与细胞凋亡密切相关。本实验拟探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠肺泡II型上皮细胞(alveolar epithelial cell Ⅱ,AECII)PTEN表达及细胞凋亡的影响。 研究方法:采用胰酶及胶原酶消化法,消化孕19d的SD大鼠胎肺组织后,经差数离心及反复贴壁法,分离纯化大鼠肺泡II型上皮细胞并进行原代培养,经AKP染色及SP-C免疫荧光鉴定细胞纯度后,随机分为对照组和LPS(100ug/ml)干预组,Western blotting检测不同时间点(0、6、12、24、48h)Caspase-3、PTEN蛋白表达。 研究结果:Caspase-3的表达在对照组中于24h达高峰,LPS组中随着干预时间延长而逐渐升高,同样于24h达高峰并于48h表达降低,与对照组相比,12h,24h蛋白表达明显增加(p<0.05),并且在24h可检测到Caspase-3活化片段,6h,48h Caspase-3表达无差异;PTEN在对照组各时相呈较稳定表达,在LPS组12h蛋白表达高于6h,于24h出现表达降低,与24h相比,48h蛋白表达明显降低(p<0.05),与对照组相比6h,12hPTEN表达显著增高(p<0.05); 结论:LPS诱导的AECII凋亡为Caspase-3依赖途径;凋亡与LPS干预存在时相关系;LPS对AECII PTEN表达有一定影响,但PTEN的表达可能与其诱导的AECII Caspase-3表达增高及凋亡的发生关系不大。