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苦参碱(matrine)作为我国传统中药苦参(Sophora.flavescens Ait.)的主要有效成份，具有广泛而显著的抗肿瘤活性。业已发现，苦参碱可以抑制肿瘤细胞增殖，诱导其向正常细胞分化，并促进肿瘤细胞凋亡，但因其作用途径十分复杂，机制至今仍不明确。本研究以人肝癌细胞株HepG2为对象，研究苦参碱抗肝癌作用及机理。
1.依据组合正交试验方案L<,18>(2<1>×3<7>)，我们选择培养基、细胞接种密度、血清含量、双抗浓度、pH值、胰蛋白酶浓度、Hanks液清洗次数、消化时间八个因素，其中培养基因素分为二个水平，其余每因素分三个水平。制备4×10<4>个/mL细胞悬液并培养1～10d，显微镜下观察细胞形态，细胞计数法测定细胞生长曲线及细胞分裂指数。结果表明，HepG<,2>细胞体外培养最佳条件为：含15％FBS的DMEM培养基，接种密度为4×10<4>个/mL,0.5％双抗，pH 7.2；汇合度达95％～100％时，Hanks洗三次，0.05％胰酶.EDTA消化1min。
2.设10个苦参碱实验组，使其终浓度分别为0.2、0.3、0.5、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5g/L；另设PBS对照组。制备4×10<4>个/mL细胞悬液并培养1～4d，光镜下分别观察活细胞及HE染色细胞形态；细胞计数法测定实验组HepG<,2>细胞生长曲线及细胞分裂指数；MTT法检测苦参碱对实验组细胞的抑制率。另设9个苦参碱实验组，使其终浓度分别为0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5g/L，MTT法测定抑制率。结果显示，苦参碱浓度小于0.2g/L时，对HepG<,2>细胞的增殖呈负抑制作用；大于0.3g/L时，呈正向抑制作用，且随作用时间的延长与剂量的增加，苦参碱对HepG<,2>细胞抑制率升高，其作用阶段表现为：0.3～0.8g/L抑制细胞生长；0.8～1.5g/L诱导细胞分化；大于1.5g/L诱导细胞凋亡；达2.5～3.5g/L致部分细胞坏死。
3.设9个苦参碱实验组，使其终浓度为0.3、0.5、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5g/L；另设PBS对照组。制备4×10<4>个/mL细胞悬液并培养3d，通过SABC免疫组化方法检测苦参碱对用药前后HepG<,2>细胞增殖相关因素AFP和PCNA的影响，以及。HepG<,2>细胞分化、凋亡相关基因c-myc、bcl.2和bax的蛋白表达变化。结果显示，对照组细胞AFP、PCNA、C-myc和Bcl-2均为不同程度阳性，免疫组化胞浆或胞核呈棕黄色：Bax表达呈阴性，免疫组化不显色。与对照组细胞相比，实验组细胞Bax阳性增强，胞浆呈淡黄色；其它蛋白阳性程度均不同程度减弱，胞浆或胞核呈淡黄色。
本研究表明，低浓度苦参碱对HepG<,2>细胞有一定的负抑制作用；浓度大于0.3g/L的苦参碱可抑制HepG<,2>细胞增殖，使部分恶性增殖表型减弱或消失，其抑制作用呈时间和剂量依赖性；而诱导细胞分化和凋亡可能主要是通过抑制AFP、PCNA、c-myc和bcl-2等相关基因表达的途径来实现的。