在人们更多关注哺乳动物和鸟类保护的同时,却忽略了一个庞大而古老的家族——两栖动物,特别是其中的蛙类。我国蛙类资源丰富,根据中国蛙类目录统计,我国共有蛙340余种。由于蛙类能适应陆地和水域的不同生存条件,加以生活环境的多变,使其感染寄生虫可能性的幅度亦相应扩大。这不仅会对蛙类自身造成影响,而且会对人类健康产生威胁。本研究旨在对实验室2013~2014年检获的蛙类棘头虫和线虫进行感染情况调查和种类鉴定,以便了解蛙类寄生棘头虫和线虫的概况,为相关研究及防控工作的开展奠定基础。1.蛙的种类鉴定为了确定用于寄生虫感染所剖检蛙的种类,利用线粒体12S序列对98只青蛙和84只蟾蜍的种类进行了鉴定。首先分批次提取青蛙和蟾蜍的肝脏、肠道或血液DNA,并进行PCR扩增、测序。将测序所得结果进行BLAST对比后,利用最大似然法构建系统发育树。结果显示,90只青蛙为黑斑蛙(Rana nigromaculata),8只为虎纹蛙(Hoplobatrachus rugulosus),84只蟾蜍为中华大蟾蜍(Bufo gargarizans),这与传统的形态学观察结果一致。2.两种蛙的棘头虫和线虫感染情况的初步调查对2013~2014年两年收集的90只黑斑蛙和84只中华大蟾蜍,经过编号后并进行剖检,按脏器检查、收集寄生虫体,记录并统计棘头虫与线虫寄生部位、感染率和感染强度。结果显示:在90只黑斑蛙体内共收集棘头虫和线虫550条,其中棘头虫314条,线虫236条。总体感染率为65.56%,棘头虫为41.11%,线虫为50%;平均感染强度为9.32条。而在黑斑蛙体内不同的脏器感染中,肠道感染率最高,为77.97%,其次为胃和肺。在84只中华大蟾蜍体内共收集棘头虫和线虫1422条,其中棘头虫207条,线虫1215条。总体感染率为86.90%,棘头虫为28.57%,线虫为84.52%;平均感染强度为19.48条。而在中华大蟾蜍体内不同的脏器感染中,肺脏的感染率最高,为73.97%,其次为肠和生殖系统。通过对检出虫体形态的初步观察,发现棘头虫有1科2属,线虫有5种。但具体是哪一种类需要进一步的研究。本调查结果为初步掌握上海市黑斑蛙与中华大蟾蜍寄生棘头虫与线虫虫感染状况和做好寄生虫病的防治提供了基础依据。3.两种蛙的棘头虫的种类鉴定本研究对黑斑蛙和中华大蟾蜍体内检获的521条棘头虫,按每只蛙体每个脏器至少制作一张封片的原则,结果共制作65个封片。然后进行形态学观察,仔细测量棘头虫吻钩数目及排列方式、是否有体棘、睾丸的位置及排列方式、粘液腺数目和排列方式以及虫卵形状等特征,并与文献对比。结果鉴定出2属7种棘头虫,分别是蟾蜍伪棘头虫(Pseudoacanthocehpalus bufonis)、黎氏阮伪棘头虫(Pseudoacanthocephalus nguyenthileae)、里斯伪棘头虫(Pseudoacanthocephalus reesei)、卢兹伪棘头虫(Pseudoacanthocephalus lutzi)、斯梅尔伪棘头虫(Pseudoacanthocephalus smalesi)、光洁棘头虫(Acanthocephalus lucidus)和蛙棘头虫(Acanthocephalus ranae)。4.两种蛙的线虫的种类的初步鉴定利用分子生物学方法对从90只黑斑蛙和84只中华大蟾蜍体内收集到的1451条线虫进行科属的判定,即按脏器的不同,分别提取肠道、肺、体腔、胃、肺、生殖道共13条线虫的DNA,利用线虫cox1引物进行PCR扩增,然后BLAST比对建立ML进化树。最后再通过形态学观察确定线虫的种类。结果显示,在1451条线虫中,共有2科2属5种,分别为棒线属线虫(Rhabdias sp.)和对盲囊属线虫(Contracaecum sp.),但是具体的种类还需形态学的进一步探索。5.中国蛙类寄生棘头虫与线虫的种类与地理分布为了解我国蛙类棘头虫与线虫的种类与地理分布,本文收集了报道我国蛙类棘头虫与线虫的相关文献,并依据较新的棘头虫与线虫分类系统整理成文。共记录在中国蛙体内检出棘头虫8种,隶属于2科、3属;线虫48种,隶属于17科、23属。本文列出了每种棘头虫与线虫的中文名称、拉丁文名称、命名人与命名年、宿主与寄生部位、地理分布及文献来源等信息,为较全面了解我国蛙类棘头虫与线虫的种类情况提供了基础材料。