马立克氏病(Marek’s disease，MD)是由鸡马立克氏病病毒(Marek’s disease virus，MDV)引起的一种鸡的高度接触性恶性淋巴肿瘤性疾病，在内脏器官、皮肤等处诱发肿瘤。近年来，由于MD毒株毒力不断增强，疫苗免疫效果明显降低，即使在一些已用CVI988/Rispens株疫苗免疫的鸡群，在其生长后期仍有肿瘤的发生，给目前的养禽业带来巨大的损失。为了研究广西近年来MDV毒株的流行、分布、毒力变化及其分子衍化规律，本文采用细胞培养、间接荧光抗体试验和PCR扩增的方法，从曾免疫过CVI988/Rispens疫苗株的患MD肿瘤的三黄鸡的外周血淋巴细胞(PBLs)和羽囊液中分离到三株MDV野毒株(分别命名为GXY1、GXY2、GXYL1)。三株MDV野毒株的细胞培养中，GXYL1感染的细胞还能与抗网状内皮组织增殖病病毒(Reticuloendotheliosis virus，REV)的单抗11B118反应，也可以用PCR扩增出REV LTR的特异性片段，说明这株MDV感染的细胞中含有传染性的REV，此病例为MDV和REV共感染；GXY1感染的细胞不能与单抗11B118反应，说明样品中不含有游离的REV，但能扩增出REV的LTR和env基因片段，同时也能扩增出禽痘病毒(Fowl poxvirus，FPV)的核蛋白4b基因片段，将细胞培养物上清再接种到DEF单层，然后再用单抗11B118进行IFA，结果为阴性，说明分离的毒株中不含有游离的REV，而再进行LTR、env和4b基因片段的PCR扩增，结果均为阳性，说明样品中的LTR和env基因片段是来源于细胞培养物上清中游离的FPV，也就是说在野毒GXY1的细胞培养中含有整合了REV基因组片段的FPV野毒；GXY2感染的细胞不与单抗11B118反应，但是能扩增出REV的LTR片段，而作为阴性对照的正常细胞却不能扩增出REV的LTR片段，说明该株MDV的基因组中已整合了REV的LTR片段。MDV-1 meq基因具有fos/jun群类转录激活因子的特征，被认为是一种转录激活因子，是MDV主要的致瘤基因。通过对三株广西分离的MDV野毒株的meq基因序列与参考株GA和RB1B株及之前我们先前研究的广西分离株的meq基因序列进行比较分析。结果表明，MDV毒株的meq基因序列相对比较保守，三株分离株的meq基因在第77、80、115、139、176、217位氨基酸分别存在一致的突变，且氨基酸第80、115、217位所有的广西分离株都因为同一个碱基的改变而分别突变为Y、A、A，与两个参考株及疫苗株不同，表现出一定的规律性。同时第139位氨基酸突变为A，国外发表的仅只有一株野毒株的meq基因序列在此位点存在突变，我们国内分离株基本上都发生了突变，这个位置的突变国外还未见报道，可能与MDV的毒力有关；而位于脯氨酸重复区的与毒力相关的第176位氨基酸突变为R，与国外发表的MDV的meq基因序列在此位置的变化(A/H)不同，是我们国内分离株所特有的。这些变化对于我们研究国内的MDV-1毒株很有意义。本研究结果表明，广西目前流行的MDV野毒株中，存在着其它病毒的共感染，不同科属病毒间存在遗传重组，并且存在整合进了REV基因组片段的天然重组MDV病毒；对MDV的致瘤基因meq基因的序列分析发现，中国内分离株中存在一个特有氨基酸的突变，国内外还未见报道。这些研究结果对于我们进一步了解和掌握MDV的毒力进化的机制以及病毒的生物学特性提供了有用的资料。