黄韧带骨化患者与正常人群血清miRNAs的对比研究

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研究背景脊柱黄韧带骨化(Spinal Ossifieation of Ligamentum Flavum,OLF)早在1920年由Polgar报道,自1964年Yamaguchi等报道OLF引起的胸椎脊髓病以来,胸椎黄韧带骨化(thoracic ossificationof ligament flavum, TOLF)的研究逐步得到各国学者的关注。OLF在脊柱的颈、胸、腰各段均可发病,以胸段尤其是下胸段最为常见。该病多见于日本人,在弥漫性特发性骨肥厚症(diffuse idiopathic skeletal hyperostosis, DISH)、氟骨症、糖尿病及强直性脊柱炎(AS)等患者中发病率较高,好发于50-70岁的中老年人群,尽管人们对黄韧带骨化的病因进行了许多基础研究与临床探讨,然而该病的病因和病理机制目前仍然不清。近年来,miRNA(microRNA)在基因转录后的调节作用使其成为多个学科的研究热点。多项研究表明niRNA在骨形成与代谢中发挥重要调控作用。miRNA作为一些长度很短的非编码RNA,通过降低靶基因的稳定性或抑制其翻译水平来影响细胞的分化、增殖和凋亡。人血清中存在稳定的miRNA,且在正常人群中表达一致,已有研究表明血清中的miRNA在机体处于疾病状态时会发生特异性改变;异常表达的特异miRNA与疾病导致的异常代谢机制有关,通过对其的研究有助于更深入的了解疾病的发病机制、疾病的早期诊断以及预后等。研究表明患有肥胖症、糖尿病、高胰岛素血症、钙磷代谢障碍等代谢性疾病的病人更易发生OLF,提示其可能存在相应的代谢异常。由此推测参与异常调控的miRNA会在血清中有所体现。迄今为止,未见有OLF患者与正常人群血清miRNA对比的相关研究。目的1.利用miRNA微阵列芯片技术筛选OLF患者与正常对照组间血清差异miRNA。2.结合生物信息学技术对差异表达的miRNA进行分析,对其靶基因进行预测;并对miRNA可能起作用的细胞间信号通路进行预测。3.通过本研究,为探讨OLF的发病机制提供了新的思路,并为OLF的预防、早期诊断以及基因治疗提供理论指导和实验依据。方法1.收集3例OLF患者以及3例年龄、性别匹配的正常对照人群的血清。提取血清中总RNA,经质控合格后,利用miRNA微阵列芯片技术对OLF患者与正常对照之间差异表达的miRNA进行筛选。筛选差异表达的miRNA的标准为:上调的Foldchange值>=2,p值
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