论文部分内容阅读
竹叶多糖有抗癌活性,抗氧化作用和免疫调节等作用,因此具有广阔的应用前景。本论文主要对毛竹(Phyllostachys heterocycla)、苦竹(Pleioblastus amarus)、绿竹(Dendrocalamopsis oldhami)及黄甜竹(Acidosasa edulis)四个种的竹子竹叶多糖进行研究,确定了超临界CO2流体萃取技术提取竹叶多糖的最佳提取工艺条件,通过分级醇沉及离子交换柱层析技术纯化竹叶多糖,利用现代分析仪器,研究竹叶多糖及其中单糖的物化特征；并对竹叶多糖的体外抗氧化能力进行了初步的探究。主要结论如下：1、试验采用静态萃取与动态萃取兼顾的超临界CO2流体提取竹多糖,选取温度、压力、萃取时间及夹带剂用量四个考察因素,选用三水平L9(34)正交试验,以竹叶多糖得率为衡量指标进行条件优化,确定最优竹叶多糖提取工艺条件：萃取温度55℃,压力40MPa,提取时间2h,夹带剂体积与竹叶质量比为3倍量的关系。四个种的竹叶多糖的实物得率分别为毛竹4.283%、苦竹4.755%、绿竹6.816%、黄甜竹5.498%；四个种的竹叶多糖超临界CO2提取物多糖含量：毛竹13.311%、苦竹24.333%、绿竹29.894%、黄甜竹15.014%。采用超临界流体萃取技术提取竹叶多糖得率明显高于传统的水提法,溶剂提取法,酶法或是微波提取法等,使用该工艺提取竹叶多糖,提取效率高、无污染、成本低。2、将超临界流体萃取技术提取的竹叶粗多糖水溶液依次用体积分数为20%,30%,40%,50%,60%,70%的乙醇分级醇沉,通过比较6种竹叶多糖醇沉物多糖得率、含量以及抗氧化能力,体积分数为70%的乙醇沉淀后的竹叶多糖各项参数较优,将该竹叶多糖醇沉物通过DEAE-52纤维素层析柱进行精制,并采用凝胶净化系统(GPC)研究竹叶多糖纯化物的物化特征,研究结果表明收集到的竹叶多糖平均分子量为5.051×104Da,以中性多糖为主。3、采用柱前衍生化气相色谱法研究竹叶多糖中单糖物化特征,即竹叶多糖经三氟乙酸水解、乙酰化和气相色谱分析,结果表明,四个种的竹叶多糖水解后均含甘露糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、木糖和岩藻糖七种单糖。不同种的竹叶总单糖含量范围在2.316～6.396mg/g,其中绿竹总单糖GC含量最高,为6.396mg/g,其次为毛竹3.821mg/g,苦竹2.841mg/g,黄甜竹2.316mg/g。在苦竹、绿竹、毛竹竹叶多糖中葡萄糖含量最高,在30.319-37.301%之间,黄甜竹竹叶中半乳糖GC含量最高为30.382%。绿竹中葡萄糖与半乳糖含量较高,二者之和占七种单糖总量的59.058%。纯化后的毛竹叶多糖中单糖含量为2.277mg/g,其中鼠李糖：岩藻糖：阿拉伯糖：木糖：甘露糖：葡萄糖：半乳糖的量的比为1.318：2.100：1.189：1.016：1：4.776：1.318。4、对毛竹叶多糖体外抗氧化活性进行了初步研究,结果表明竹叶多糖有较强的抗氧化能力：1g未纯化的毛竹叶提取物相当于9.178gVc,1g纯化后的竹叶多糖提取物相当于3.927gVc,纯化后的竹叶多糖的总抗氧化能力是纯化前的竹叶多糖的总抗氧化能力的42.79%,分析原因可能是由于采用超临界流体萃取技术提取的竹叶多糖粗提物中的非多糖组分与竹叶多糖协同作用,增加了粗多糖的抗氧化能力；将竹叶多糖纯化物折算成总多糖之后IC50值为0.175,Vc的DPPH的IC50值为0.158,竹叶多糖对DPPH的清除能力与Vc的IC50值很接近,表明纯化后竹叶多糖DPPH清除自由基的能力较高。综上所述,本试验首次采用超临界C02流体萃取技术提取竹叶中的多糖,该工艺提取竹叶多糖,提取效率高、无污染、成本低；利用现代分析仪器,获得了竹叶多糖及其中单糖的物化特征,通过对竹叶多糖的体外抗氧化能力进行了初步的探究,证实了竹叶多糖的有较强的抗氧化能力,上述研究结果可为竹叶资源的深加工利用提供理论支撑及数据支持,所得数据对于合理利用生物量丰富的竹叶资源及制备高含量竹叶多糖具有重要的指导意义。