【摘 要】
：
目的:核仁是真核细胞细胞核内没有膜结构包被的细胞器,由于其结构的特殊性,赋予它细胞应激反应中枢控制器的功能。核仁应激是指由于细胞受到外界刺激而发生的一种维持细胞稳态的适应性反应。众所周知,核仁是核糖体生物合成的主要场所,核仁应激发生会导致核糖体合成及成熟受损,因此核仁应激也称为“核糖体应激”。核仁应激或核糖体应激反应伴随着核糖体合成受损,从而引起“核糖体病”、肿瘤及神经退行性疾病等疾病的发生,但核
论文部分内容阅读
目的:核仁是真核细胞细胞核内没有膜结构包被的细胞器,由于其结构的特殊性,赋予它细胞应激反应中枢控制器的功能。核仁应激是指由于细胞受到外界刺激而发生的一种维持细胞稳态的适应性反应。众所周知,核仁是核糖体生物合成的主要场所,核仁应激发生会导致核糖体合成及成熟受损,因此核仁应激也称为“核糖体应激”。核仁应激或核糖体应激反应伴随着核糖体合成受损,从而引起“核糖体病”、肿瘤及神经退行性疾病等疾病的发生,但核仁应激导致以上疾病发生的作用机制至今尚未明确。因此,研究核仁应激发生机制及由其引发的疾病发生机制,对疾病的治疗及预防具有重要意义。目前对于核仁应激的研究手段基于外界刺激诱发核仁内核仁结构改变,核仁蛋白发生核质易位,达到核仁应激的目的,而对于由细胞内源性改变引起的核仁应激鲜有报道。为此,我们试图构建一种能够从细胞内源性水平来实现核仁应激反应的系统,并结合蛋白组学分析研究内源性核仁应激反应发生后细胞生物学特征的变化,为进一步研究核仁应激作用机制提供一定的思路。方法:1.细胞系模型的构建本研究运用CRISPR/Cas9技术结合同源重组原理在人T淋巴瘤细胞Jurkat E6-1中构建针对核仁标志蛋白NPM1的生长素诱导型降解系统。通过基因型水平、蛋白水平、细胞水平的验证,证明所构建的细胞系为纯合型敲入细胞系。加入诱导剂诱导核仁标志蛋白NPM1降解后,通过免疫荧光及免疫印迹实验观察其降解效果,最终得到理想的细胞系模型。加入诱导剂48 h后,内源核仁蛋白NPM1降解效率达到90%以上。2.内源性核仁应激反应发生的验证通过免疫荧光观察核仁标志蛋白（NCL）的定位;细胞计数的方式观察细胞增殖情况;流式细胞术观察细胞周期的变化。3.对核仁应激发生前后细胞进行蛋白组学分析对核仁应激发生前后细胞进行蛋白组学分析,将差异表达蛋白进行基因本体论（GO）富集分析,京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析,PPI蛋白互作网络分析,寻找内源性核仁应激发生相关的蛋白及其所参与的信号通路。4.蛋白组学结果的验证通过实时荧光定量PCR的方法检测蛋白p53、CHEK1、AURKA转录水平的变化,同时运用免疫印迹实验检测和分析蛋白HJURP表达水平的变化。结果:1.成功构建针对核仁标志蛋白NPM1的E3泛素化依赖的生长素诱导型降解系统。2.核仁标志蛋白NPM1降解,细胞增殖抑制,细胞周期阻滞于G1/S期,NCL发生核质易位。3.蛋白组学分析结果表明,内源性核仁应激发生,影响线粒体结构与功能相关蛋白的表达及信号通路。4.核仁标志蛋白NPM1降解,HJURP蛋白表达水平下降;同时核仁应激发生,p53转录水平上调,而CHK1、AURKA转录水平下降,与蛋白组学结果一致。结论:E3泛素化依赖的生物素诱导降解系统（AID系统）降解核仁蛋白NPM1,是内源性核仁应激的重要方式,内源性核仁应激使细胞增殖抑制及细胞周期阻滞,其与线粒体能量产生与转换具有相关性。
其他文献
再生障碍性贫血（aplastic anemia）是免疫介导的骨髓造血衰竭综合征，标准的免疫抑制治疗（IST）方案是抗胸腺细胞球蛋白（ATG）+环孢素（CsA），限制其疗效最主要的因素是患者残存造血干/祖细胞过少。促血小板生成素受体激动剂（TPO-RA）艾曲泊帕刺激残存造血干/祖细胞增殖，与ATG及CsA组成三药方案，明显改善IST疗效，而不良反应未有明显增加。
＜正＞“2012年，陕西省出台了全国首部公共信用信息地方性法规《陕西省公共信用信息条例》。随着陕西省经济社会不断发展，面对社会诚信和信用体系建设的新要求、新问题，制定一部社会信用方面的综合性法规，对完善我省社会信用法治建设，营造诚实守信的社会环境，推动全省社会信用体系建设高质量发展，更好服务全省经济社会发展大局具有重要意义。”近日，陕西省发展改革委主任张晓光在接受记者就今年3月1日正式施行的《陕西
＜正＞社会信用体系建设是落实“放管服”改革、提升社会治理水平的系统性工程，也是优化营商环境、推动高质量发展的重要抓手。自2014年6月14日国务院出台《社会信用体系建设规划纲要（2014-2020年）》以来，在党和国家的高度重视下，以推进政务诚信、商务诚信、社会诚信和司法公信四大重点领域诚信建设为核心的社会信用体系建设蹄疾步稳，信用法规制度建设有序推进；统一社会信用代码实现全覆盖，实现“一照一码走
目的 观察基于镜像神经元的动作观察训练（AOT）对脑瘫（CP）儿童平衡和步行能力的影响，以期为改善CP儿童下肢运动功能提供临床依据。方法 选取湘雅博爱康复医院2021年10月-2022年2月收治的99例CP儿童按数字表法随机分为AOT组（50例）和对照组（49例）。AOT组和对照组儿童均进行常规康复治疗，AOT组每日行40 min的AOT,先观察有运动内容的视频，后执行观察到的动作；对照组先观察与
艾曲泊帕等TPO受体激动剂的加入，重型再生障碍性贫血的免疫抑制治疗疗效取得一定提高，因具有长期治愈的优势，造血干细胞移植、尤其是替代供者造血干细胞移植治疗的进展更为迅速。同胞相合供者造血干细胞移植一直是≤50岁再障患者首选的一线治疗，其适应证具有向51～60岁发展趋势；非血缘相合供者造血干细胞移植广泛应用于儿童重型再障之外，一线治疗成人重型再障的研究也显示出良好疗效和较少的移植物抗宿主病；亲缘单倍
目的探索近年来络病学领域发展的研究热点和前沿动态。方法检索2010年1月1日—2022年2月25日中国知识资源总库（CNKI）中络病学的文献。利用CiteSpace软件导入文献数据,进行文献关键词共现、聚类、突现分析,绘制科学知识图谱并开展计量学分析。结果共获得2 311篇络病学文献,主要涉及内容为疾病、诊断、病机治则、药物及方法、研究总结5大类。聚类形成"新型冠状病毒肺炎""糖尿病肾病"2类疾病
2020年10月至2021年3月，为配合三门峡市刚玉砂厂棚户区改造工程的实施，河南省文物考古研究院联合三门峡市文物考古研究所对该地进行了考古发掘，其中编号为M003的唐代墓葬形制完整，出土物丰富。根据墓志志文，判定墓葬年代为盛唐时期。该墓的发现为进一步研究三门峡地区唐代丧葬习俗提供了详实的实物资料。
浅层学习下学生的学习是被动的，学生思维也停留在浅层，只会死记硬背、机械训练，无法真正理解知识，更谈不上灵活应用。如何让学生主动学习、积极探索，掌握知识间的关联，并能迁移知识，举一反三?课题组在研究中尝试使用精准教学模式，助力学生进行深度学习，提高学生的学习效果。在“积的变化规律”一课中，笔者借助UMU互动学习平台（以下简称UMU）进行精准教学尝试，利用平台的大数据等信息技术帮助分析学情，提炼核心问
随着国家改革开放和对地方经济的扶持发展，闽东畲族民歌的研究被众多学者所关注。将21世纪以来关于闽东畲歌研究取得的成果及其所呈现的特点进行进行客观评述、梳理、总结，并提出自己的思考。同时从研究现状来看，提出一些需要反思的问题，探讨加强基础建设的理论与方法，以期推动闽东民族音乐研究的进一步发展与成熟。
“数商兴农”是未来农村电商发展的新方向，对农村电商人才培养提出新要求。当前，珠海市西部地区人才不足，尤其是中高层次人才短缺已经影响到农村电商的快速发展。珠海市坚持政府主导，营造良好的社会环境，依托高校和职业院校建立专业化人才培育基地，完善政校行企联动、市区镇齐抓共管的农村电商人才培育机制，培养孵化符合市场需求的电商“新农人”，助力乡村全面振兴。