[目的] 联合应用GM-CSF+IL-4从健康人外周血单核细胞中诱导DC，经LPS进一步诱导其成熟。通过不同途径鉴定两种Dc的成熟程度，为LPS促进DC的进一步成熟提供了实验依据。半定量RT-PCR检测TLRs mRNA在DC上的表达水平，激光共聚焦扫描显微镜检测NF-κ B在核内外的分布情况，从基因及分子水平探讨LPS促进DC成熟的可能机制。从HBV DNA阳性肝癌患者外周血单核细胞中诱导HCC DC，加入LPS促进其成熟，比较HCC DC与健康人DC在形态及功能的差异，分析HCC DC上TLRs mRNA的水平，提出了肝癌患者的TLRs信号传导通路缺失学说，为HCC的发病提供了新的解释。 [方法] 联合应用GM-CSF+IL-4从健康人外周血PBMC中诱导DC，在培养的第6天加入促成熟因子LPS，继续培养24h。收获细胞待检。分别采用倒置相差显微镜、扫描电镜、透射电镜观察DC的形态；流式细胞仪检测DC表面的分子标志；HRP吞噬实验测定DC的吞噬能力；MTT法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力；ELISA检测DC培养上清中IL-12、TNF-α以及MLR中IFN-γ的水平。通过形态以及功能等鉴定DC的成熟程度。流式细胞仪检测DC表面CD14的表达；半定量RT-PCR分析DC上TLR2、3、4mRNA的水平；激光共聚焦扫描显微镜检测NF-κ B在核内外的分布情况。从分子水平及基因水平探索LPS促进DC进一步成熟的机制。从HBV DNA阳性肝癌患者外周血中分离单核细胞，经联合应用GM-CSF+IL-4诱导DC，培养的第6天加入LPS，24h后收获细胞，并与健康人DC加以比较。采用前面所述的检测方法从形态、功能方面鉴定HCC DC在经LPS刺激前后的成熟程度；从分子、基因水平探索HCC DC中TLRs信号传导通路的情况；分析LPS经TLRs信号传导通路作用于HCC DC，对其进一步成熟有无促进作用。