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植物在生长发育过程中受到各种非生物胁迫的影响,解析胁迫应答相关基因的功能有助于解释植物的胁迫应答分子机制及调节机理。bHLH转录因子是植物转录因子中最大的家族之一,在真核生物的生长发育过程中起重要作用,其功能研究在动物中进展较快,而植物bHLH家族转录因子的功能只有小部分得到解析。本研究以干旱条件下差异表达的基因OsbHLH59, OsbHLH63为功能候选基因,通过转基因株系在盐胁迫条件下的表型及生理指标分析,以期进一步深入剖析其抗逆分子机制。同时,我们采用RT-PCR技术对一系列MYB转录因子在低温处理条件下的表达模式进行了研究,探讨其在耐冷性不同的水稻品种LTH、IR29中的表达情况,为进一步分析MYB基因的抗逆性功能奠定了基础。1.首先对候选基因OsbHLH59, OsbHLH63在不同抗性的水稻品种中进行表达分析。结果表明,两个基因在耐盐聚合系177-103盐胁迫处理条件下,叶中的表达受到抑制,而根中的表达上调；且候选基因OsbHLH63激活或抑制的表达水平更为显著一些。而在低温处理条件下,两个候选基因在耐冷品种LTH和冷敏感材料IR29中表达情况相似,均表现为在冷处理后期下调表达,但在恢复时期,候选基因在材料LTH中恢复表达水平,而在IR29中继续保持下调表达。两个基因在盐、低温处理条件下均显著差异表达,初步说明候选基因OsbHLH59、OsbHLH63可能与盐、低温胁迫反应相关。2.通过构建候选基因OsbHLH59、OsbHLH63的过表达载体,对水稻品种日本晴进行遗传转化,并获得阳性转基因植株,以T2代转基因为材料,进行盐处理鉴定表型变化,结果显示OsbHLH59的过表达转基因植株与对照相比无明显的耐盐性的增强或减弱,候选基因OsbHLH63的过表达转基因植株H29与对照相比耐盐性较强,特别是具有强的恢复能力。OsbHLH63的转基因株系在脯氨酸的含量上与对照有明显差异,在盐处理的四个时间点含量均高于对照,表明OsHLH63的高水平表达提高植株脯氨酸含量,从而增强盐引起的渗透胁迫耐受性。3.以耐冷粳稻品种丽江新团黑谷及冷敏感籼稻品种IR29为研究材料,采用荧光定量PCR分析4℃低温条件下MYB转录因子候选基因的表达模式。研究发现45个MYB基因在两个品种中的低温胁迫表达谱存在较大差异,鉴定了部分LTH特异冷胁迫差异表达MYB基因。另外有小部分MYB基因在两个品种表达方式一致,但表达量存在较大差异。结果表明MYB基因低温胁迫下的不同表达方式或差异表达量可能与两个品种的不同耐冷性相关,研究为进一步分析耐冷候选MYB基因功能打下了基础。