番茄亲本与F1的RAPD分析及相关性分析

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdhjy
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本试验采用了22个番茄材料,调查了它们的生物学性状和室内品质,运用CTAB法提取了材料的DNA,并对RAPD反应条件,各反应试剂浓度和琼脂糖浓度进行了优化,其主要结果如下:1.利用改良CTAB法提取了材料的DNA,其OD260/OD280比值在1.8~2.0之间,OD260/OD230大于2,而且电泳图谱清晰可见,所提取的DNA含有较少的杂质,符合RAPD的要求。2.采用正交试验设计的方法,建立了RAPD优化反应体系。所得最优体系为:25ml中含有模板DNA40ng,引物0.25μmol/L,dNTP200μmol/L,Tapase1.25U,10×PCRbuffer2.5μL,25m mol/LMgCl2,1.5μL,ddH2O14μL。适宜的扩增条件为94℃预变性5 min,94℃变性30s,36℃复性30s,72℃延伸1min,40个循环后,在72℃保持7分钟。3.琼脂糖浓度在1.6%和2.0%时都能将不同的DNA分开,而且电泳图谱清晰可见,本试验选用1.6%的琼脂糖浓度。4.从40个随机引物中筛选出11个多态性好的随机引物,用这11个引物对22个番茄材料进行扩增,11个引物共扩增出了74条DNA带,平均每个引物6.72条,其中61条具有多态性,占总条带数的82.4%,平均每个引物5.1条多态性带。5.对供试22个材料进行了聚类分析,亲缘关系分析,发现F1有偏向于父本遗传的趋势。对遗传距离和单果重、株高、可溶性固性物含量进行了相关性分析,结果表明均呈不显著相关。用RAPD遗传距离对杂种优势的预测有待进一步研究。
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