海藻糖对实验性干眼病鼠结膜上皮细胞的影响

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目的:评价海藻糖溶液对摘除主泪腺的大鼠实验性干眼疾病疗效。方法:SD大鼠30只,即共60只眼,随机化的分正常对照组、生理盐水组、海藻糖组,每组10只,即20只眼。正常对照组处置不给予,海藻糖组和生理盐水组由摘除大鼠的主泪腺制作成干眼模型动物。生理盐水组及海藻糖组在造模术后一周时间点分别用生理盐水、海藻糖滴眼液治疗双眼,治疗一共4周,每天4次。分别在造模术前以及造模术后的1,2,3,5周时间点行酚红棉线的泪液值检测,角膜上皮的荧光素钠染色估计评分;造模5周以后处死大鼠,使用免疫组织化学的实验方法对结膜的上皮细胞中Bcl-2和Bax凋亡相关基因蛋白表达进行检测,探讨干眼模型的动物结膜的上皮细胞间凋亡和眼球表面干眼疾病改变的联系。结果:酚红棉线的泪液值试验值表示,造模术后各时间点海藻糖组和生理盐水组泪液的检测值较正常对照组的明显下降,差异均有统计学意义,即P<0.05;除了用药的4周后,海藻糖组的较生理盐水组泪液的检测值增加,两组相比有统计学差异即,P<0.05,其余时间点都没统计学差异,即P>0.05。角膜上皮的荧光素钠染色评分结果表示,造模术后第1周,生理盐水组和海藻糖组的评分明显高于正常对照组(0);术后第2周后,生理盐水组和海藻糖组的评分无统计学差异外,即P>0.05,随着时间的延长,术后第3周和第5周时,两组评分差异均有统计学意义,即P<0.05,且海藻糖组的评分是小于生理盐水组。结膜上皮的细胞中免疫组织化学检测实验显示,正常对照组的结膜上皮的细胞Bax蛋白质阳性表达目较生理盐水组的和海藻糖组少,且正常对照组的与生理盐水组比较差异有统计学意义,即P<0.05,与海藻糖组比较差异无统计学意义,即P>0.05;正常对照组可见大量Bcl-2蛋白阳性表达,且多于海藻糖组,差异无统计学意义,即P>0.05,多于生理盐水组,差异有统计学意义,即P<0.05;生理盐水组中结膜上皮的细胞里可见很多Bax蛋白阳性表达于细胞质,呈棕黄色颗粒,海藻糖组中Bax蛋白阳性表达的相对于生理盐水组的明显较少,两者差异有统计学意义,即P<0.05;海藻糖组的结膜上皮的细胞能见大量Bcl-2蛋白的阳性表达,生理盐水组的Bcl-2蛋白表达相对于海藻糖组的明显减少,差异有统计学意义,即P<0.05。结论:本次研究的结果提示了海藻糖溶液可以减少角膜表层的上皮脱落,对结膜上皮的细胞有一定保护改善的作用,可以拮抗结膜的上皮细胞间的凋亡,进而可以增加角结膜的上皮屏障的作用,改善因为干燥状态而引起的眼表面上皮的损伤;本次研究的结果是支持海藻糖溶液可用于眼表面的上皮疾病潜在的临床应用的,为治疗眼球表面疾病如干眼疾病提供了一些治疗的选择。
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