目的:通过成功建立适合穿刺的兔VX2骨肿瘤动物模型,探讨自制封闭穿刺取出装置及技术对于控制骨肿瘤动物模型穿刺并发症发生的应用性研究。方法:在动物养殖场购买新西兰大白兔43只,生物试剂公司购买VX2肿瘤组织块。1、随机选取1只实验兔,采用组织悬液法,建立兔VX2肌肉肿瘤模型,对其进行大体及超声影像学评估,确认建立VX2肌肉肿瘤模型后,取出肿瘤组织,部分用于后续实验,剩余VX2肿瘤组织液氮冻存待用。在剩余实验兔中随机选取2只作为空白对照。2、在剩余40只实验兔中随机选取10只,采用组织悬液法直视下进行肿瘤细胞植入,成功建立兔骨肿瘤模型后定期、分批处死实验兔,与空白对照组实验兔一同行X线、病理组织检查。评估种植部位对侧骨皮质破溃的临界时间(在肿瘤细胞最易扩散到骨皮质周围组织的情况下采用封闭栓封堵,以争取最大限度实现自制装置控制穿刺并发症的临床试验目的)。3、确定好适合穿刺时间后,在剩余30只实验兔左侧胫骨近端干骺端处植入肿瘤细胞,建立兔VX2左侧胫骨骨肿瘤动物模型,实验兔右侧胫骨未处理。将其随机分成实验组与对照组各15只,实验组采用自制封闭穿刺取出装置进行双侧小腿相同部位的穿刺活组织检查(活检),穿刺后封堵骨孔;对照组采用传统穿刺装置,穿刺后未封堵骨孔。穿刺1小时后,采用彩色多普勒超声(彩超)检查对两组穿刺孔周围出血情况进行评估比较。穿刺后第2周,处死两组实验兔,采用病理学检查对两组穿刺孔周围和正常兔的左侧胫骨近端骨皮质周围穿刺针道肿瘤细胞扩散情况进行评估比较。两次评估均采用SPSS19.0软件进行统计学分析,P值小于或等于0.01将被认为所检验的差别有统计学意义。结果:1、成功建立兔vx2肌肉肿瘤模型,并且获得大量vx2活体肿瘤组织。2、于40只实验兔中随机挑选出10只,成功制备成兔骨肿瘤模型。随后定期、分批处死模型,种植部位的肿瘤细胞于植入后1-2周髓内生长、2-3周髓内生长并破坏对侧骨皮质、3-4周对侧骨皮质破溃并浸润周围软组织。确定肿瘤细胞破坏对侧骨皮质并导致其破溃的临界时间约为肿瘤细胞种植后第3周。3、剩余两组30只实验兔成功制备成骨肿瘤动物模型。(1)穿刺1小时后,彩超显示实验组封闭栓均无脱落,其中,2只(13.33%)实验兔穿刺孔出血,形成血肿,其余13只实验兔穿刺孔周围无明显液体渗出;对照组14只(93.33%)实验兔穿刺孔有出血,形成血肿,剩余1只无明显出血,两组穿刺孔出血率统计学上具有可比性,差异有统计学意义(p<0.01),超声影像结果表明自制封闭穿刺装置及技术对穿刺孔进行封堵后控制出血、血肿形成效果较好,优于传统穿刺装置及方法。(2)穿刺后第二周处死两组实验兔,实验组封闭栓均无脱落,两组采样阳性率100%,所得组织均能进行he染色并且可以镜下观察。实验组中肿瘤细胞浸润周围组织0例,肿瘤细胞扩散率为0,对照组14只(93.33%)实验兔穿刺孔周围有肿瘤细胞扩散,两组穿刺孔周围肿瘤细胞扩散率统计学上具有可比性,差异有统计学意义(p<0.01),病理结果表明穿刺后14天内采用自制封闭穿刺取出装置及技术对穿刺孔进行封堵后控制肿瘤细胞扩散效果较好,优于传统穿刺装置及方法。结论:自制封闭穿刺取出装置及技术能够运用于骨肿瘤动物模型的研究,是一套能够进行穿刺取样并且可以封堵穿刺孔的器械及技术。该器械组合式穿刺骨皮质,外侧套管隔绝皮质外组织与骨髓腔,针芯穿刺使髓腔与外界形成通道,取样后于套管内放入自制封闭栓及时封堵骨穿刺孔,防止骨髓腔内组织液渗透到皮质外,从而避免骨髓腔内组织液、肿瘤细胞向外渗透与扩散。自制封闭穿刺取出装置及技术能够对目标进行精确病理取样的同时在病理结果出现之前避免穿刺后并发症的发生,相对于传统穿刺装置及方法更安全并且工具结构简单、易于操作,对于临床工作意义重大。