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大豆疫霉(Phytophthora sojae)近年来逐渐成为大豆的一种毁灭性病害,导致大豆的严重减产,给国内的油料作物生产带来严重的影响,影响了经济的稳定发展。随着大豆疫霉的全基因组测序完成,大豆疫霉的转化体系和RNAi干扰技术的逐渐成熟,大豆疫霉成为了研究卵菌功能基因的模式物种。琥珀酸脱氢酶(Succinatedehydrogenase,SDH),是三羧酸循环(TCA)的关键酶,是TCA循环中唯一一个嵌入到膜上的多亚基酶,在生物体中具有重要的作用,是连接氧化磷酸化和电子传递的枢纽,为生物体的需氧和产能呼吸链提供电子。琥珀酸脱氢酶是多亚基调控的酶,其中A亚基包含:一个共价连接的FAD、琥珀酸的结合位点、辅酶Q的结合位点;B亚基包含有三个铁硫族:2Fe-2s、3Fe-4s、4Fe-4s。琥珀酸脱氢酶的活性一般可以做为三羧酸循环的运行程度指标,是TCA循环的关键酶,而TCA循环为大豆疫霉整个生长过程提供能量。本实验通过扩增大豆疫霉中琥珀酸脱氢酶A亚基中氨基酸残基的保守编码基因序列,构建了Ps SDHA的沉默表达载体,利用PEG介导的原生质体稳定转化实验获得了该基因的沉默突变菌株。通过qRT-PCR实验筛选出具有良好的沉默抑制效果的沉默突变菌株A1和A3。通过沉默突变菌株的表型分析得出:在10%V8固体培养基中培养,沉默突变体的生长情况明显较模式菌株6497缓慢;在10%V8液体培养基中培养,沉默突变菌株菌丝形态发生突变,模式野生菌株6497的菌丝较细长,分叉少,沉默突变菌株菌丝短粗,分叉多;在含有0.7M NaCl、0.01%SDS、3mMH2O2、200ng/mL刚果红的10%V8培养基中培养,沉默突变菌株的生长均受到明显的抑制;在其对大豆寄主进行离体叶片和整株活体侵染实验中得出结论,沉默突变体的致病性明显降低。