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目的探讨过表达沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,Sirt1)对高糖诱导的人肾小球系膜细胞(Human glomerular mesangial cell,HMC)增殖与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,并进一步探究Sirt1对高糖诱导效应影响的可能机制。方法(1)体外培养人肾小球系膜细胞(HMCs),利用Sirt1、Sirt1干扰(Sirt1-RNAi)或相应对照重组慢病毒载体感染细胞获得过表达Sirt1蛋白或knock down Sirt1的人肾小球系膜细胞;(2)慢病毒感染的HMCs分为8组:(1)正糖+空载慢病毒感染组(NG+LV-CTL),(2)高糖+空载慢病毒感染组(HG+LV-CTL),(3)正糖+Sirt1慢病毒感染组(NG+LV-Sirt1)(4)高糖+Sirt1慢病毒感染组(HG+LV-Sirt1)(5)正糖+无义RNAi病毒感染组(NG+LV-CTL-RNAi),(6)高糖+无义RNAi病毒感染组(HG+LV-CTL-RNAi)(7)正糖+Sirt1-RNAi病毒感染组(NG+LV-Sirt1-RNAi)(8)高糖+Sirt1-RNAi病毒感染组(HG+LV-Sirt1-RNAi);再设立3组未感染细胞作为对照,分别为(1)正常对照组(NG,葡萄糖5.5 mmol/L)、(2)正糖+甘露醇组(NM,5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇),(3)高糖处理组(HG,葡萄糖浓度30 mmol/L),培养不同时间后以CCK-8法检测细胞增殖情况;实时定量PCR法检测TGF-β1的mRNA水平,Western blot法检测各处理组细胞TGF-β1蛋白表达水平;(3)低糖、高糖处理HMC细胞不同时间后,通过Western blot或免疫共沉淀+Western blot检测STAT1、STAT3磷酸化、乙酰化水平;(4)通过Western blot或免疫共沉淀+Western blot检测正糖、高糖处理24小时后的LV-CTL、LV-Sirt1、LV-Sirt1-RNAi组STAT1磷酸化、乙酰化水平;(5)免疫共沉淀检测内源性Sirt1与STAT1相互结合作用。结果(1)通过重组慢病毒感染,嘌呤霉素筛选,获取稳定过表达Sirt1和Sirt1干扰的人肾小球系膜细胞系;(2)与NG组相比较,各时间点HG、HG+LV-CTL、HG+LV-Sirt1、HG+LV CTL-RNAi、HG+LV-Sirt1-RNAi组CCK8的OD检测值均明显升高(P均<0.05)。HG处理24h、48h后,HG+LV-Sirt1组的OD值明显低于HG、HG+LV-CTL组,HG+LV-Sirt1-RNAi组的OD值明显高于HG、HG+LV-CTL组;与NG组相比较,HG、HG+LV-CTL、HG+LV-Sirt1组TGF-β1mRNA以及蛋白水平明显上调,差异均有显著性(P均<0.05);HG+LV-Sirt1组TGF-β1 mRNA以及蛋白水平明显低于HG、HG+LV-CTL组,而LV-Sirt1-RNAi组的TGF-β1 mRNA以及蛋白水平明显高于HG、HG+LV-CTL-RNAi组(P均<0.05);NG、NM、NG+LV-CTL及NG+LV-Sirt1、NG+LV-CTL-RNAi组间相比较,无统计学差异;(3)高糖以时间依赖性的方式增加STAT1及STAT3磷酸化、乙酰化水平;(4)与NG+LV-CTL组相比,HG+LV-CTL组、HG+LV-Sirt1-RNAi组的STAT1磷酸化、乙酰化水平均升高,与HG+LV-CTL组相比较,HG+LV-Sirt1组STAT1乙酰化水平下降,HG+LV-Sirt1-RNAi组STAT1乙酰化水平升高(P均<0.05),HG+LV-CTL组、HG+LV-Sirt1组和HG+LV-Sirt1-RNAi组的磷酸化水平无明显差异(P>0.05);(5)正向、反向免疫共沉淀均能够检测到Sirt1蛋白与STAT1蛋白间的结合。结论过表达Sirt1水平能够抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖、TGF-β1表达以及STAT1、STAT3的乙酰化水平,相反,沉默Sirt1的表达增强了高糖的处理效应;Sirt1可能是通过去乙酰化STAT1而发挥其拮抗高糖诱导效应的作用;Sirt1可能成为防治糖尿病肾病的作用靶点。