低频超声波对糖尿病大鼠难愈性创面愈合的影响及机制研究

来源 :川北医学院 | 被引量 : 3次 | 上传用户:dy112334
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目的:观察低频超声波辐照治疗对糖尿病大鼠创面愈合的影响,并探讨其可能的机制,为治疗糖尿病难愈性创面的新方法提供理论依据。方法:将45只健康雄性Wistar大鼠随机分为3组,即超声波治疗组15只,常规治疗组15只,空白对照组15只,通过对大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠建模成功并稳定3周后,构建大鼠背部全层皮肤缺损模型。超声波治疗组予以生理盐水换药后低频超声波辐照15分钟,每日一次,常规治疗组予以每日生理盐水换药一次,空白对照组不予任何处理。各组大鼠分别于创面造模当天(第1天)、7天、14天、21天观察创面情况,计算创面愈合率,并取创面组织行HE染色,观察创面炎症细胞、成纤维细胞、胶原蛋白及新生血管生成情况;实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测创面组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的mRNA相对表达情况。实验数据采用SPSS 23.0软件包进行统计学处理。结果:1.大鼠一般情况:正常大鼠体型肥硕,毛发光泽,夜间活动频繁,糖尿病大鼠造模成功后,糖尿病大鼠精神萎靡,夜间活动减少,呈现典型糖尿病多饮、多食、多尿、消瘦的“三多一少”征象。2.创面愈合情况及创面愈合率:超声波治疗组创面愈合情况及愈合率优于其他两组,创面炎症逐渐消退,肉芽组织生长较快,创面逐渐缩小;常规治疗组创面炎症消退缓慢,肉芽组织生长缓慢,创面愈合缓慢;空白对照组创面感染,可见坏死组织,创面愈合甚慢。超声波治疗组第7、14、21天创面愈合率高于常规治疗组和空白对照组,且差异有统计学意义(p<0.05)。3.HE染色显示:超声波治疗组新生血管生成、成纤维细胞增殖及胶原纤维合成情况优于其他两组,且炎性细胞消退速度快于其他两组。炎症消退快于其他两组。4.Real-Time PCR检测显示:TGF-β1:第1天时各组创面组织中TGF-β1的mRNA相对表达量均较低,差异无统计学意义;第7天时各组相对表达量较前升高,超声波治疗组高于其他两组,但差异无统计学意义;第14天时各组相对表达量较前进一步升高,超声波治疗组高于其他两组,且与这两组比较差异有统计学意义(p<0.05);第21天时各组相对表达量较前有所下降,但超声波治疗组仍高于其他两组,且差异有统计学意义(p<0.05)。VEGF:第1天时各组创面组织中VEGF的mRNA相对表达量均较低,差异无统计学意义;第7天时各组相对表达量较前升高,超声波治疗组高于其他两组,但差异无统计学意义;第14天时各组相对表达量较前进一步升高,超声波治疗组高于其他两组,且与这两组比较差异有统计学意义(p<0.05);第21天时各组相对表达量较前有所下降,但超声波治疗组仍高于其他两组,且与这两组比较差异有统计学意义(p<0.05),常规治疗组较空白对照组高,且差异有统计学意义(p<0.05)。TNF-α:第1天时各组大鼠创面组织TNF-α的mRNA相对表达量均较低,差异无统计学意义(p>0.05);第7天各组较前升高,超声波治疗组低于其他两组,与常规治疗组比较差异无统计学意义(p>0.05),与空白对照组比较差异有统计学意义(p<0.05);第14天时超声波治疗组和常规治疗组较前下降,超声波治疗组较常规治疗组低,且差异有统计学意义(p<0.05),而空白对照组较前升高;第21天时超声波治疗组和常规治疗组较前进一步下降,超声波治疗组较常规治疗组低,且差异有统计学意义(p<0.05),而空白对照组较前再次升高。IL-6:第1天时各组大鼠创面组织中IL-6的mRNA相对表达量均较低,差异无统计学意义(p>0.05);第7天时各组较前升高,超声波治疗组低于其他两组,与常规治疗组比较差异无统计学意义(p>0.05),与空白对照组比较差异有统计学意义(p<0.05);第14天时超声波治疗组和常规治疗组较前下降,超声波治疗组较常规治疗组低,且差异有统计学意义(p<0.05),而空白对照组较前升高;第21天时超声波治疗组和常规治疗组较前进一步下降,超声波治疗组较常规治疗组低,且差异有统计学意义(p<0.05),而空白对照组较前再次升高。结论:1.低频超声波辐照治疗能促进糖尿病大鼠溃疡创面新生血管形成、成纤维细胞增殖及胶原纤维合成,促进肉芽组织生长,促进创面愈合。2.低频超声波辐照治疗能上调糖尿病大鼠溃疡创面血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA表达。3.低频超声波辐照治疗能下调糖尿病大鼠溃疡创面肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的mRNA表达,促进炎症消退。4.低频超声波辐照治疗具有安全无创、有效等优点。
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