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目的:从猪囊尾蚴cDNA中扩增出GP50编码基因,亚克隆至真核表达载体,利用所得的重组蛋白,为建立一种灵敏检测猪囊尾蚴感染的实验方法作准备。方法:设计并合成引物,从猪囊尾蚴cDNA文库中PCR扩增GP50编码基因,通过与线性克隆载体pGEM-T连接,经酶切和PCR鉴定及DNA测序证实后,将目的基因亚克隆入双表达载体pBK-CMV,将获得的pBK-CMV-GP50阳性重组子转化宿主菌E.coli BL21,IPTG诱导表达,Western blot鉴定。结果:PCR法扩增出了一897bp左右的DNA片断,将重组质粒pGEM-T-GP50、pBK-CMV-GP50分别作BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,均能得到一个大小与PCR扩增产物一致的插入片断,对插入片断的测序结果表明,GP50具有一个长度为897bp的完整开放阅读框(ORF),编码298个氨基酸,理论分子量33kDa,与GenBank收录(编号为AY212945)的猪囊尾蚴GP50基因具有高度的同源性(99%)。表明GP50基因的克隆和亚克隆均获成功,用IPTG诱导带有重组质粒pBK-CMV-GP50的大肠杆菌,产物行SDS-PAGE,可得到一约36kDa融合蛋白,Western-blot法鉴定该蛋白能被猪囊尾蚴感染的人血清所识别。