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临床资料显示老年人多有排尿障碍,随着衰老而出现尿频、尿不尽等症状,老年大鼠也有类似的排尿障碍,这可能与排尿的神经调节或排尿器官的衰老性改变有关。脊髓参与排尿控制的传出核团位于腰骶膨大处,这些排尿相关核团接受许多下行神经纤维的支配,其中5-羟色胺能神经纤维的信息传递在排尿控制中起着十分重要的作用。
研究发现脑内5-羟色胺能神经体系具有明显的老年性改变,表现为有关脑区5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)标记信号的显著减少。SERT是位于5-羟色胺能神经末梢的一种膜蛋白,它从突触间隙中特异性重摄取5-羟色胺入突触前末梢,从而终止5-羟色胺对突触后神经元的作用,其表达变化直接影响5-羟色胺能神经体系参与的神经活动,是检测5-羟色胺能神经元功能活性的重要标记物。5-羟色胺能神经体系在腰骶髓排尿相关核团是否也有类似的改变目前尚未见相关报道。
目的:本研究利用免疫组织化学方法分析老年大鼠腰骶髓排尿相关核团SERT免疫阳性纤维和膨体分布及反应强度的变化,探讨衰老对大鼠腰骶髓SERT表达的影响以及5-羟色胺能神经体系在排尿反射中发挥的作用,以期为探究老年人排尿障碍的神经生物学机制提供部分实验资料。
方法:选取10只5月龄雄性Wistar大鼠(河北医科大学实验动物中心提供),饲养至24月龄,其间正常饮食饮水,动物饲养室温度控制在23±3℃,每笼各3只饲养于昼夜交替的环境当中,随机选取其中6只大鼠作为实验组,同时领取6只3月龄雄性Wistar大鼠(河北医科大学实验动物中心提供)作为对照组。随后以免疫组织化学的方法显示雄性Wistar大鼠腰骶髓排尿相关核团5羟色胺转运体的免疫反应强度及其分布年龄相关的改变。
结果:(1)SERT标记的一般观察:大鼠脊髓腰骶膨大部排尿相关核团含有较丰富的SERT免疫反应阳性纤维及膨体,点状的免疫反应膨体分布于核团神经元胞体周围。两组大鼠所观察核团SERT免疫反应阳性纤维和膨体的分布方式未见明显区别,但免疫反应强度在两组间存在显著差异,24月龄组大鼠SERT免疫反应阳性纤维及膨体在灰质后连合(dorsal grey commissure,DGC)、中间外侧核(intermediolateral nucleus,IML)、前角(ventral horn,VH)、背外侧核(dorsal lateral nucleus,DLN)和球海绵体肌脊髓核(spinal nucleus of the bulbocavernosus,SNB)少于3月龄组大鼠。(2)SERT标记的灰度值分析:通过静态灰度值发现,3月龄组DGC121.23±4.4;IML114.66±12.94;VH127.00±14.91;DLN113.27±3.62;SNB118.59±6.7;SPN118.45±8.68,24月龄组DGC139.88±8.64;IML128.47±19.06;VH138.42±6.44;DLN129.29±8.25;SNB124.58±13.01;SPN120.63±11.56。与3月龄组大鼠相比,24月龄组大鼠SERT免疫反应阳性轴突和膨体在部分观察核团的灰度值发生了显著升高,其中在DGC升高了13.3%(p<0.01),在IML、VH、DLN和SNB分别升高了10.7%、8.3%、12.4%和5%(p<0.05),具有统计学意义。SPN处SERT免疫反应阳性轴突和膨体灰度值在3月龄组和24月龄组无明显区别,但存在升高的趋势。
结论:老年大鼠腰骶髓排尿相关核团SERT免疫反应强度较青年组减弱。提示5羟色胺能神经纤维对这些核团支配随衰老而减少,这可能与老年排尿障碍发生的神经生物学机制有关。