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目的:本课题基于“药辅合一”原则,以柚皮素为抗肝癌模型药物,以中药脂肪油薏苡仁油为研究对象,在评定薏苡仁化学成分与抗肿瘤抗氧化活性相关的基础上,从成辅料性和成辅药性角度出发,进行薏苡仁油提取工艺及质量评价、柚皮素-薏苡仁油纳米结构脂质载体制备及评价的研究,比较薏苡仁油与常用液体脂质在制剂成形、释药及抗肿瘤活性等方面的特点。为柚皮素-薏苡仁油协同抗癌提供一种新型的纳米制剂,为传统“药辅合一”策略在现代制剂中的应用提供进一步的参考。方法:1.建立薏苡仁中甘油三油酸酯和1,2-油酸-3-亚油酸甘油酯的HPLC含量测定方法,以及油酸和亚油酸的GC含量测定方法。同时采用MTT法测定体外抗肝癌细胞增殖活性,以及DPPH法测定抗氧化能力。采用多元线性回归分析15个产地薏苡仁有效成分含量与抗肿瘤抗氧化活性以优选产地;2.通过单因素试验及响应面优化试验,对超声水酶法提取薏苡仁油进行工艺考察,并根据“药辅合一”策略对提取的薏苡仁油进行物理参数与有效成分含量测定及稳定性考察;3.采用体外协同给药试验,确定柚皮素为模型药物及协同比例。通过单因素试验及响应面优化试验,确定熔融乳化超声法制备柚皮素-薏苡仁油纳米结构脂质载体(NCNLC)的最佳工艺,并制备常用液体脂质辛癸酸甘油酯(NDNLC)及油酸纳米结构脂质载体(NONLC);4.考察纳米结构脂质载体的表观形态、粒径分布、Zeta电位分布,测定包封率、载药量及体外释放行为。采用体外细胞毒性试验及流式细胞术考察载药NLC对肝癌细胞的细胞毒性,促细胞凋亡情况。结果:1.含量测定方法学符合分析要求,测定结果表明甘油三油酸酯及1,2-油酸-3-亚油酸甘油酯的总含量与抗肿瘤活性成正相关;甘油三油酸酯与亚油酸的总含量与抗氧化活性成正相关,并选择云南薏苡仁作为后续研究药材来源。2.以有效成分含量及提油率为指标,确定了超声水酶法提取薏苡仁油的最佳工艺为药材粉碎过60目,料液比1:5,超声50分钟,调节碱性蛋白酶p H值为9.00,加酶量2%,酶解2.5小时,酶解温度40℃。薏苡仁油性状为淡黄色液体脂质,折光指数为1.451,酸值为0.58,碘值为103,皂化值为171,相对密度为0.917;有效成分含量1,2-油酸-3-亚油酸甘油酯及甘油三油酸酯的含量为1.43±0.11%、1.72±0.09%;建立了薏苡仁油特征图谱。3.采用微柱法测定包封率为指标,采用单因素试验及响应面优化试验,优化了处方工艺为:75 mg单硬脂酸甘油酯、75 mg薏苡仁油、15 mg柚皮素,250 mg吐温-80,10 m L去离子水,磁力揽拌10 min形成初乳,超声细胞破碎仪(功率100 w)超声分散25 min冰浴固化,经0.22μm微孔滤膜过滤,即得。4.NCNLC在透射电镜下呈圆球状,轮廓规整,粒径在50 nm左右,分布均匀,包封率与载药量为91.77±0.48%、6.96±0.22%,体外释放具有一定缓释效果,符合一级动态释放模型,在p H 7.40下,释放药物释放更快,累积释放率更高。在p H 5.00及p H 7.40下,NCNLC相较于NDNLC、NONLC均有较好的释放度。稳定性试验结果表明,NCNLC在30天内性质稳定。细胞毒性试验及细胞凋亡实验结果均表明薏苡仁油作为辅药制备的NCNLC能提高药物对Hep G2细胞的细胞毒性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,与常规油相组对比均有统计学意义(*P<0.05)。结论:本课题遵循“药辅合一”原则,将中药薏苡仁油同时作为纳米结构脂质载体中的液体脂质辅料和辅助抗肿瘤成分,包埋难溶性抗肿瘤药物柚皮素,在体外释药、对药物的溶解性能及协同抗肿瘤作用等方面呈现出优势,为中药液体脂质在纳米剂型中的运用提供了新的思路,同时也为传统“药辅合一”在现代制剂中的应用提供新视角。