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目的：育龄夫妇中约有10%的夫妇患有不孕不育，其中约30%是由男性因素所引起的。引起男性不育的原因很多，如腮腺炎等。但是大多数不育患者的病因目前仍不明确，被称为特发性不育。雄激素，主要是睾酮和5-α双氢睾酮，对于睾丸的发育、精子发生、精子在附睾中的成熟都具有重要的作用。雄激素是通过与雄激素受体相结合起作用的，雄激素受体基因的缺陷可以引起雄激素不敏感综合症。重者表现为女性化；轻者性分化正常，而只表现为生精功能的损害。所以雄激素受体基因的异常在男性不育中的作用越来越受到人们的重视。雄激素受体基因包括8个外显子，因为外显子A较长，一般把它分为5段来扩增，外显子A编码转录活性域，外显子A的突变会导致其增强效用的降低，减弱了其对靶基因表达的调节，大大降低了雄激素受体的效用。本研究应用分子生物学的方法来分析雄激素受体基因外显子A中发生突变较多的A2和A3与特发性无精症以及严重少精症的关系。方法：选择2001年10月至2002年10月到我院就诊的不育病人36例，其中包括无精症患者20例，严重的少精患者16例。另外选择40例已经生育过的健康男性作为对照组。1.基因组DNA的提取。抽取外周血5ml，分离提纯白细胞，加入细胞核裂解液、蛋白酶K、10% SDS，37<WP=4>℃过夜，以Tris饱和酚及饱和酚：氯仿（1：1）分别抽提，然后加入冰无水乙醇沉淀得到基因组DNA，最后75%的乙醇洗涤后用TE溶解待用。2.基因突变的分析。用2对引物分别对提取的基因组DNA进行聚合酶链反应（PCR），（A2：5，- C A C A G G C T A C C T G G T G C T G G A-3，，5，- C T G C C T T A C A C A A C T C C T T G G C-3，；A3：5，- G C T C C C A C T T C C T C C A A G G A C A A -3，，5，-C G G G T T C T C C A G C T T G A T G C G-3，） ，A2片段的正常长度为416bp，A3片段的正常长度为528bp。将扩增产物分别进行2%的琼脂糖凝胶电泳，根据条带泳动位置是否发生改变来检测插入、缺失突变；再取部分产物经加热变性后进行单链构象多态性分析（SSCP），最后经银染的方法来识别点突变，如果有点突变发生，则出现单链DNA泳动位置的改变，或者单链的数目增加。另外每个研究对象我们都作了染色体分析，染色体核型均为46，XY。结果：在40例正常对照组中没有发现插入、缺失、点突变，突变率为0%。病例组中发现5例突变，突变率为13.8%。36例病例中均没有发现大片段的插入、缺失突变，5例都为点突变，其中3例发生了A2的点突变（2名特发性无精患者和1名严重少精患者）；另外2例发生了A3的点突变（2名病人分别为特发性少精患者和严重少精患者），经过统计学分析，得知病例组和对照组间雄激素受体基因外显子A中的A2、A3突变率有显著性差异（X2=3.90, P<0.05）。<WP=5>结论：雄激素受体基因外显子A中的A2和A3的突变是引起不明原因的无精、严重少精性不育的重要原因之一。对于那些不明原因的无精、严重少精患者应该做雄激素受体基因突变的检测以明确病因。