龙须藤总黄酮对佐剂关节炎大鼠的治疗作用及其机制的初步研究

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目的:本文以佐剂性关节炎大鼠(adjuvant arthritis,AA)为RA的动物模型,通过多发性关节炎指数、继发侧足趾肿胀度和踝关节病理学等指标研究龙须藤总黄酮对大鼠佐剂关节炎的治疗作用及其对AA大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的影响,初步探讨龙须藤总黄酮抗佐剂关节炎的作用机制。方法:于大鼠左后足趾皮内注射完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)0.1ml致炎,建立AA大鼠模型。从中选取造模成功的大鼠随机分为模型组,龙须藤总黄酮低、中、高剂量组(1.7,3.4,6.8 mg/kg),雷公藤多苷片组(7.53 mg/kg),未注射CFA的大鼠作为空白组。通过对体重、全身炎症指数评分、多发性关节指数评分、继发侧足脚肿胀度、免疫器官指数及踝关节病理检查等指标,观察不同剂量龙须藤总黄酮对佐剂关节炎大鼠的影响。采用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,初步探讨龙须藤总黄酮抗佐剂关节炎的作用机制。结果:1.龙须藤总黄酮对AA大鼠体重的影响模型组和空白组的体重均呈现增重的趋势,模型组大鼠体重涨幅与空白组大鼠相比较低并有显著性差异(P<0.01)。龙须藤总黄酮中、高剂量组(3.4、6.8mg/kg)均可增加AA大鼠的体重,使体重得到不同程度的恢复和改善。2.龙须藤总黄酮对AA大鼠全身炎症指数的影响AA大鼠致炎后,不仅出现多发性关节炎肿胀,还能引起鼻部充血、双耳红肿和尾部产生结节等全身性的免疫炎症反应,于d19~d22全身炎症指数达到高峰并在致炎d28左右肿胀开始消退。龙须藤总黄酮各组均能降低AA大鼠全身炎症指数,其中龙须藤总黄酮高剂量组(6.8 mg/kg)的作用最为显著。3.龙须藤总黄酮对AA大鼠多发性关节指数的影响龙须藤总黄酮各组均能降低AA大鼠关节指数,其中龙须藤总黄酮中、高剂量组(3.4、6.8 mg/kg)均可明显抑制AA多发性关节指数,且与模型组比较有明显统计学差异(P<0.01)。4.龙须藤总黄酮对AA大鼠继发侧关节肿胀度的影响与空白组比较,模型组大鼠的继发性关节肿胀度明显增加,且有统计学意义(P<0.01),说明成功建立AA模型。龙须藤总黄酮各组对AA大鼠继发性关节肿胀度均有抑制作用,其中龙须藤总黄酮高剂量组(6.8 mg/kg)的抑制作用更为显著。5.龙须藤总黄酮对AA大鼠脾脏指数和胸腺指数的影响与空白组大鼠相比,模型组大鼠的脾脏和胸腺指数增加显著,有明显的统计学差异(P<0.01)。龙须藤总黄酮各组对AA大鼠胸腺指数影响不大,只有龙须藤总黄酮高剂量组对脾脏指数有显著的抑制作用;6.龙须藤总黄酮对AA大鼠脾脏病理学的影响与空白组大鼠相比,模型组大鼠的脾小体结构异常,白髓增生扩展向红髓,且与红髓分界模糊,红髓中红细胞增多及炎性细胞浸润。龙须藤总黄酮各组均可不同程度改善AA大鼠的脾脏的病理学变化。7.龙须藤总黄酮对AA大鼠继发侧踝关节病理学的影响与空白组相比,模型组大鼠的踝关节出现滑膜细胞增生变厚、大量炎性细胞浸润、血管翳形成、关节腔隙变窄、关节软骨和骨组织被破坏等变化。龙须藤总黄酮各组均能使AA大鼠非致炎侧踝关节滑膜细胞增生减少、细胞浸润减轻等。8.龙须藤总黄酮对AA大鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α的含量的影响模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量均出现明显升高,且与空白组相比有统计学差异(P<0.01);实验结果表明:龙须藤总黄酮各组能不同程度地降低AA大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量。结论:(1)龙须藤总黄酮各组对佐剂关节炎大鼠具有良好的治疗作用,其中高剂量作用更明显。(2)龙须藤总黄酮的治疗机制可能与抑制IL-1β、IL-6和TNF-α分泌有关。
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