稻瘟病菌三个侵染表达上调基因的功能研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:daney_he
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稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是目前研究丝状真菌的重要模式生物。为了探索水稻与稻瘟病菌互作的分子机理,本文从稻瘟病菌全基因组基因芯片中挑选了三个该菌侵染水稻后表达上调倍数比较高的基因,对它们进行基因敲除,同时对其中的两个基因进行过量表达,分析它们的表型变化,以初步确定它们在稻瘟病菌侵染致病过程中的作用。首先构建了三个基因的敲除载体和MGG06834.6与MGG03891.6基因的过量表达载体,然后通过原生质体转化,获得基因的缺失突变体和过量表达突变体。突变体表型分析发现,MGG03356.6缺失突变体在菌落形态,孢子萌发,致病性方面与野生型没有显著差别,而在疏水性表面上附着胞形成率比野生型菌株KU70低;MGG06834.6缺失突变体的表型与对照菌株也没有明显变化,但过量表达突变体的产孢量降低,且附着胞形成提前,而致病性减弱;MGG03891.6的缺失突变体的表型与野生型菌株没有显著差别,但过量表达突变体的附着胞形成滞后,且致病性也有所减弱。RT-PCR分析表明,MGG06834.6和MGG03891.6在野生型菌株中表达量很低。这些结果表明它们可能在稻瘟病菌侵染致病过程中充当一定的作用。同时,我们利用SDS的胁迫来观察细胞壁的完整性,实验结果发现,敲除MGG03356.6和MGG03891.6基因对细胞的完整性影响不明显,而敲除MGG06834.6基因后病菌对SDS抗性较弱,说明细胞完整性减弱,因此MGG06834.6可能是细胞完整性的调控因子。
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