【摘 要】
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作为目前发现是为有效的杀虫剂之一的阿维菌素,其生产水平的提高关键在于阿维菌素高产突变株的获得以及发酵工艺的优化。 本实验对阿维菌素的生产菌株采用了半理化的筛选方
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作为目前发现是为有效的杀虫剂之一的阿维菌素,其生产水平的提高关键在于阿维菌素高产突变株的获得以及发酵工艺的优化。 本实验对阿维菌素的生产菌株采用了半理化的筛选方法:出发菌株R-V-22经UV、NTG和MMS三轮的处理,同时分别以氮亮氨酸、氯乙酸钠和2-去氧葡萄糖作为筛子,最后得到高产抗性突变株AV-4-56,其阿维菌素B1a的产量提高了60%左右。 对高产菌株AV-4-56的培养条件进行优化,结果表明:AV-4-56相对于出发菌株R-V-22生长速度快,通气量要求偏高,以剪切力的敏感度降低,可以耐受0.1%的KH2PO4。加入0.1%的磷酸镁的捕铵剂和5.0ppm的Zn2+和40ppm的Co2+可以提高阿维菌素的产量。同时采用正交试验法确定最佳碳氮源的比例,并且在发酵优化条件的基础上,研究了种子的种龄和接种量的影响,最后,AV-4-56在摇瓶培养条件下比出发菌株R-V-22的阿维菌素产量提高了70%。 考察了高产菌株AV-4-56和出发菌株R-V-22在2吨种子罐和80吨发酵罐的代谢特性。结果表明:高产菌株AV-4-56比出发菌株R-V-22的代谢来得快,它在发酵培养48hr左右pH就下降到6.0附近,氨基氮消耗到整个发酵周期的最低水平,而菌丝浓度增加到最高水平,其生长转为产素期。但消沫剂用量和动力需求量都比出发菌株R-V-22要高10%以上。高产菌株AV-4-56比出发菌株的每天糖耗速率要高1.0%左右,因而其在80吨发酵罐的10天发酵周期内,阿维菌素B1a的产量可以达到2500ug/ml以上,比出发菌株R-V-22的产量提高了60%。
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