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背景： 肾癌在成人恶性肿瘤中占2％，是泌尿系肿瘤患者的第三大死亡原因。尽管目前的诊断技术已经比较先进，但是仍有30%左右的肾癌患者在确诊时已发生转移。晚期肾癌患者对放化疗的敏感性差，治疗效果不理想，免疫治疗（如IL-2和IFN-α）也只对10%～20%的患者有效。因此，迫切需要寻找新的有效的治疗靶点和治疗策略。 UHRF1(Ubiquitin-like protein containing PHD and RING finger domains1)是多功能核蛋白 UHRF家族的成员之一，具有多个结构域，包括一个泛素样结构域、一个植物同源结构域（plant homeodomain，PHD）、一个SET和RING相关（SET and RING associated, SRA）结构域和一个环指（RING finger）结构域。UHRF1在多种肿瘤中呈高表达，并可通过特定结构域参与DNA甲基化修饰和组蛋白翻译后修饰，从而调控基因表达，参与肿瘤的发生发展。研究发现，UHRF1在肾癌组织中也呈高表达，且其表达水平与肾癌的病理分期和组织学分级密切相关。但是UHRF1在肾癌发生发展中的具体机制尚不清楚。因此我们拟探讨UHRF1在肾癌发生发展中的作用及相关的分子机制，以期为寻找新的肾癌诊断指标和治疗靶点提供理论基础和实验依据。 目的： 1．明确UHRF1在肾癌细胞增殖、凋亡及侵袭过程中的作用； 2．明确UHRF1调节肾癌细胞增殖、凋亡及侵袭的分子机制； 方法： 1．设计并合成针对UHRF1的siRNA，转染肾癌769-P和786-O细胞后利用Western blot和RT-PCR分别在蛋白水平和mRNA水平检测UHRF1的表达情况，验证siRNA的干扰效果。 2．用干扰效果良好的siRNA转染769-P和786-O细胞后，用MTT检测细胞增殖，并绘制细胞生长曲线，用流式细胞术检测细胞凋亡，利用Transwell实验检测细胞的侵袭能力，检测UHRF1的表达下调对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。 3．用已经证实干扰效果良好的表达shUHRF1的慢病毒和对照病毒感染769-P和786-O细胞后，接种于裸鼠皮下，每3天测量一次肿瘤长短径，计算肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线。 4．利用数字基因表达谱技术，比较shUHRF1表达下调的769-P细胞和对照细胞中的差异表达基因，得到可能受UHRF1调控的下游靶基因，通过RT-PCR对这些差异表达基因进行验证，发现在UHRF1表达下调的细胞中肿瘤抑制基因TXNIP的表达显著上调。 5．用干扰效果良好的siRNA同时下调TXNIP和UHRF1，比较与单独下调UHRF1的细胞在细胞增殖、凋亡及侵袭能力的差异。 6．针对TXNIP基因的启动子区设计引物，利用抗UHRF1的抗体及对照抗体进行染色质免疫共沉淀（ChIP）实验，检测UHRF1是否直接结合于TXNIP基因的启动子区，从而调控其表达。 结果： 1．在肾癌细胞769-P和786-O中下调UHRF1的表达后，细胞凋亡明显增加，细胞增殖及细胞侵袭能力明显减弱。 2．UHRF1表达下调的769-P和786-O细胞在裸鼠体内的生长受到显著抑制。 3．在肾癌细胞中下调UHRF1的表达后，肿瘤抑制基因TXNIP的表达水平明显上调。 4．同时下调TXNIP和UHRF1的表达，可有效挽救单独下调UHRF1所引起的增殖和侵袭抑制及凋亡，说明TXNIP是UHRF1的有效下游靶基因。 5．ChIP结果显示UHRF1可特异性地富集于TXNIP基因的启动子区，UHRF1可能直接参与了TXNIP的表达调控。 结论： UHRF1参与调节肾癌细胞的增殖、凋亡和侵袭特性。UHRF1可能通过直接调控肿瘤抑制基因TXNIP的表达而参与肾癌的恶性进展。