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目的：使用shRNA干扰技术,抑制整合素a6β4的表达,筛选稳定表达a6shRNA和β4 shRNA的非小细胞肺癌细胞株,体外实验研究整合素a6β4在非小细胞肺癌生长中的作用及其可能的机制,为非小细胞肺癌早期诊断和治疗提供新的靶点,为以整合素a6β4信号通路为靶点的肺癌治疗奠定理论基础。材料与方法：1.qRT-PCR验证稳定表达a6 shRNA和β4 shRNA的H460SM中整合素a6β4的表达水平,显微镜下观察细胞形态的变化。2.细胞计数、MTT、MTS实验分析敲除a6整合素表达的非小细胞肺癌细胞H460SM-75、H460SM-76,敲除B4整合素表达的非小细胞肺癌细胞H460SM-68、H460SM-71在体外的生长状况,研究抑制a6和B4整合素表达对非小细胞肺癌细胞生长的影响。3.流式细胞术分析敲除a6β4整合素表达对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响。4.流式细胞术分析敲除a6β4整合素表达对非小细胞肺癌细胞周期分布的影响,初步研究抑制a6β4整合素表达对非小细胞肺癌细胞生长作用的可能机制。结果：1.与非特异性基因敲除的非小细胞肺癌细胞(H460SM-NS)相比,敲除a6整合素的非小细胞肺癌细胞(H460SM-75、H460SM-76)的a6整合素表达明显降低(P=0.001,P=0.000)；敲除B4整合素的非小细胞肺癌细胞(H460SM-68、H460SM-71)的B4整合素表达明显降低(P=0.000,P=0.000)。2.与非特异基因敲除非小细胞肺癌细胞(H460SM-NS)相比,敲除B4整合素的非小细胞肺癌细胞(H460SM-68、H460SM-71)的增殖明显减慢,敲除a6整合素的非小细胞肺癌细胞(H460SM-75、H460SM-76)的增殖无明显差异。3.非小细胞肺癌细胞H460SM-NS、H460SM-68、H460SM-71、H460SM-75、H460SM-76之间的凋亡率有差异,但没有统计学意义(P=0.071)。4.H460SM-68、H460SM-71在G0/G1期中的分布高于H460SM-NS在G0/G1期中的分布(P=0.017,P=0.013),提示细胞周期可能被阻滞在G1/S检测点,导致H460SM-68、H460SM-71的增殖延迟。5.β4 shRNA稳定表达的非小细胞肺癌细胞H460SM-68、H460SM-71的增殖指数PI低于对照组细胞H460SM-NS,说明干扰整合素β4的表达可能抑制非小细胞肺癌细胞的增殖。结论：1.成功构建a6、β4 shRNA稳定表达的非小细胞肺癌细胞株。2.抑制β4整合素的表达可能抑制非小细胞肺癌细胞的增殖。3.抑制a6、B4整合素的表达,可能不影响非小细胞肺癌细胞的凋亡。4.β4 shRNA稳定表达的非小细胞肺癌细胞增殖可能受到抑制,考虑与细胞周期调控有关。