TGF-β1调节剂穿心莲有效部位抗肿瘤药效学研究

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穿心莲Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees是我国一味常用的中药材,具有清热解毒,抗炎消肿的功效,被誉为”中药抗菌素”。近年来的研究表明,以穿心莲内酯为代表的二萜内酯类成分具有广谱的抗肿瘤活性。穿心莲有效部位(AEP)是采用超分子技术对穿心莲醇提物进行富集,得到的穿心莲超分子提取物,含穿心莲内酯(A),14-去氧穿心莲内酯(DA),脱水穿心莲内酯(DDA)成分。本课题拟研究穿心莲有效部位(AEP)对小鼠乳腺癌细胞4T-1、小鼠肺癌细胞LLC和人源肺癌细胞A549在体内外的抑制作用及对免疫调节因子TGF-β1的影响,探讨穿心莲有效部位的抗肿瘤作用。在体外研究中,以AEP为模型药物,以小鼠乳腺癌细胞4T-1和小鼠肺癌细胞LLC为肿瘤模型,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,考察药物对肿瘤细胞增值的抑制作用。结果显示:AEP对肿瘤细胞的增殖具有明显的生长抑制作用,并呈时间、剂量依赖性,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.05),对4T-1细胞的IC50值是(47.33+1.36)μM(24h)和(26±0.93)μM(48h),对LLC细胞的IC50值是(39.6±1.27)μM((24h)和(31.7±1.01)μM(48h),对于两种细胞的抗肿瘤作用均强于穿心莲内酯。在抗鼠源肿瘤细胞的体内研究中,以AEP为药物模型,以小鼠乳腺癌细胞4T-1接种BABL/C小鼠右腋皮下和小鼠肺癌细胞LLC接种于C57BL/C、鼠右腋皮下为肿瘤模型,以抑瘤率,生命延长率,脏器指数,血清生化指标(SOD,LDH,3-GT,AKP,5-NT),病理切片为指标,通过灌胃给药考察AEP对4T-1肿瘤和LLC肿瘤的抑制作用。结果显示,AEP对实体瘤4T-1和LLC均具有很好的抑制作用,抑瘤率分别为4T-168.82%,LLC74.34%,与阴性对照组相比差异有显著性(P<0.05)。AEP组与生理盐水组比显著延长了小鼠的生存期,差异有非常显著性(P<0.01),并且改善了小鼠精神状态;给药组的脏器指数与阴性对照组的脏器指数无显著性差异,说明药物对脏器组织无明显的损害作用;血清生化指标SOD在给药组中的活性与生理盐水组相比有显著性提高,说明药物能改善机体的抗氧化系统;肿瘤血清四项特异性生化指标的结果与阴性对照组相比也有不同程度的降低,提示药物对机体在肿瘤发展后期,对损伤脏器有治疗和改善的作用;病理切片分析显示,肿瘤细胞在肿瘤组织和转移脏器组织上的形态学改变,提示药物抗肿瘤通过使肿瘤细胞固缩、裂解和炎症坏死。在抗人源肿瘤细胞的体内实验中,以AEP为模型药物,BABL/C裸鼠接种人源肺癌细胞A549为肿瘤模型,通过灌胃给药,考察药物对肿瘤的抑制作用。结果显示,AEP对A549有很好的抑制作用,抑瘤率达78.75%,与生理盐水组相比差异有显著性(P<0.05)并且给药组小鼠精神状态较生理盐水组有明显改善。在小鼠转化生长因子TGF-β1的研究中,以AEP为药物模型,小鼠乳腺癌细胞4T-1和小鼠肺癌细胞LLC为肿瘤模型,通过MTT实验和小鼠转化生长因子TGF-β1试剂盒,考察药物对肿瘤细胞在生长发展过程中对TGF-β1分泌的影响。结果显示AEP可以有效的抑制肿瘤细胞对TGF-β1的分泌,起到很好的免疫调节作用。本课题发现,AEP在体外和体内对小鼠乳腺癌细胞4T-1和小鼠肺癌细胞LLC都有较好的抑制作用,对人源肺癌细胞A549在体内也有较好的抑制作用,对肿瘤细胞对转化生长因子TGF-β1的分泌也有显著的抑制,通过免疫调节作用发挥抗肿瘤疗效。
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