库尔勒香梨黑斑病潜伏侵染机理研究

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库尔勒香梨是新疆的优势果品,是特色的林果之一,由于生长期黑斑病的潜伏侵染,在采后的贮藏过程影响果实的品质及商品价值,造成一定的经济损失。本文对香梨黑斑病病原菌进行形态学和分子生物学的鉴定,确定侵染病菌的种类,研究了病菌的生物学特性、侵染时间和侵染途径以及生长期及采后贮藏期果实酚类、酶类与黑斑病抗性的关系,目的是分析黑斑病潜伏侵染可能的原因,对有效防治黑斑病,提高果实的贮藏品质具有重要的实践意义。以冷库中的腐烂香梨为研究对象,对病原菌进行分离,纯化,通过传统的形态学观察,确定病菌孢子,菌丝的形态,结合分子生物学的鉴定,通过对病菌26SrDNAD1/D2区序列的测定,与GenBank核酸数据库进行比对,确定香梨黑斑病的病原菌为链格孢属交链孢菌(A.alternata)。生物学特性的研究以纯化的交链孢菌为实验材料,分别在不同温度(5℃-40℃)、不同pH值(pH4-pH13)、不同湿度(18%-100%)条件下,通过测定病菌孢子萌发率及菌丝生长量,确定病菌的最适生长条件,结果表明:黑斑病病菌孢子的萌发最适条件为:温度25℃-28℃,相对湿度为98%以上,pH为pH7-pH8,在此条件下孢子的萌发率最高。菌丝最适的生长条件为:温度25℃-28℃,相对湿度为58%以上,pH为6,在此条件下菌丝生长速率最快。对香梨花期和果实生长不同时期不同部位的链格孢带菌率进行了统计,结果表明侵染途径花期通过花柱扩展到子房组织,果实通过果皮侵染,少部分到达果肉。在果实幼果期就有病原菌的侵入,侵染率为7%,在膨大期侵染率大幅增加到38%,采收期到44%,果实萼部侵染率在每个时期均高于胴部和梗部,花期和果实生长期黑斑病均能侵入。分别对盛花后每间隔30天的果实、采后接种链格孢间隔24小时的果实及贮藏期每间隔30天的果实,进行总酚含量及抗性酶活性的测定,分析总酚含量及抗性酶活性的变化对果实抗病性的影响。结果表明:果实生长的不同阶段,PPO、POD、PAL、CAT酶的活性从盛花期至采收期逐渐下降,最后保持稳定,CHT、GLU酶的活性在盛花期后迅速增加,到果实膨大期达到最大值,果实成熟期时达到相对稳定的状态。贮藏期随着贮藏时间的延长,果实逐渐衰老的原因,抗性酶类的活性都在缓慢下降。接种病原菌的香梨果实,在48h后果实内总酚的含量逐渐增加,显著高于刺伤未接种的果实(P<0.05),果实在受到外界伤害以及病原菌侵入后总酚含量增加,促进细胞壁的木质化,同时诱导一些抗性物质含量的增加,抑制病菌的扩展。
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