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七彩神仙鱼(Symphysodon spp.)是我国主要观赏鱼类之一。蓝松石,天子蓝,盖子红,雪玉是目前我国市场上常见的、经济价值很高且在繁殖过程中遗传十分稳定的4个七彩神仙鱼品系。本研究通过聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳法对该4种品系七彩神仙鱼主要组织(脑、皮肤、肌肉、肝脏、胰脏、鳃、眼、心)中9种同工酶(EST、LDH、ADH、SOD、POD、CAT、COX、SDH、G-6-PD)的生化表现型进行了研究,同时对组织中的6种酶(EST、LDH、ADH、SOD、POD、CAT)的活性进行了测定。以期为七彩神仙鱼同工酶生化遗传学提供基础性资料,同时为七彩神仙鱼的品种定向选育等提供有价值的生化指标。研究主要包括以下内容:
1.七彩神仙鱼不同组织同工酶表达的差异
运用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳法,对七彩神仙鱼的8种组织(脑、皮肤、肌肉、肝脏、胰脏、鳃、眼球晶状体、心脏)中的9种同工酶(EST、LDH、ADH、SOD、POD、CAT、COX、SDH、G-6-PD)进行了研究,并对其各组织中的同工酶位点及其酶谱表型进行了分析。试验中共检测到29个基因座位,分别由相应的等位基因决定。试验结果表明,七彩神仙鱼的9种同工酶系在各组织都显示出清晰稳定的酶谱,除CAT在七彩神仙鱼各组织和个体中表现一致以外,其它8种同工酶都存在明显的组织差异性和一定的个体差异,组织差异与其生理功能相一致。肝脏和胰脏中的同工酶位点信息丰富,肝脏中的EST和ADH表达活跃;肝脏和眼中的LDH存在C位点,且眼球晶状体中的C位点存在和A、B位点杂合的情况。
2.七彩神仙鱼各组织酶活差异分析
本试验对天子蓝、盖子红、蓝松石和雪玉4个品系七彩神仙鱼主要组织(脑、皮肤、肌肉、肝脏、胰脏、鳃、眼球晶状体、心脏8种组织)中6种酶类(LDH、ADH、CAT、SOD、POD和EST)的活性进行了测定。4品系七彩神仙鱼各组织酶活性品系间差异较小,仅SOD在皮肤和肌肉中存在品系间显著差异。但组织差异性明显。试验结果显示:LDH在各品系七彩神仙鱼的心脏和胰脏中活性较高,这与心脏中的有氧代谢活跃相一致;EST和ADH在各品系七彩神仙鱼的肝脏组织中有较高活性,这与肝脏是机体重要的解毒器官有关;CAT酶在各品系七彩神仙鱼的胰脏组织中活性最高,其次为心脏,表明胰脏和心脏对个体的生长发育至关重要;除天子蓝品系神仙鱼外,SOD酶在肝脏和胰脏中活性较高,这与肝胰脏是鱼体内重要的免疫器官有关;POD酶在各品系七彩神仙鱼的胰脏、鳃和眼中表现出高活性,POD的高活性与相应组织具有较强的消除自由基的能力有关。推测酶活性与七彩神仙鱼的组织机能密切相关。
3.4个品系七彩神仙鱼的遗传距离研究
运用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳法,对4个品系七彩神仙鱼的8种组织(脑、皮肤、肌肉、肝脏、胰脏、鳃、眼球晶状体、心脏)中的9种同工酶(EST、LDH、ADH、SOD、POD、CAT、COX、SDH、G-6-PD)进行了研究,并对其各组织中的同工酶位点进行了统计和分析。9种同工酶中共检测出29个基因座位,其中(EST-4、EST-5、EST-6、EST-7、POD-1、POD-2、POD-3、SOD-1、SOD-2)共9个位点呈现多态,多态座位百分数P天子蓝=20.7%,P盖子红=27.6%,P蓝松石=24.1%,P雪玉=27.6%。每个座位的平均有效等位基因数目A为A天子蓝=1.149835026,A盖子红=1.257142857,A蓝松石=1.212794105,A雪玉=1.158729985。同时还分析了七彩神仙鱼的各品系多态座位的Hardy-Weinberg遗传偏离指数d。4个品系的七彩神仙相比较,雪玉的遗传多样性水平较高,4个品系七彩神仙鱼中蓝松石和盖子红的遗传距离最近,仅为0.0098而天子蓝和盖子红的遗传距离略远,为0.034107。