【摘 要】
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作为固着生物,植物体在其生活史中常常要遭遇生物和非生物等环境的胁迫.然而,为了适应环境条件的变化,植物体在长期的进化过程中均会形成一套完善的保护体系.这些保护措施包
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作为固着生物,植物体在其生活史中常常要遭遇生物和非生物等环境的胁迫.然而,为了适应环境条件的变化,植物体在长期的进化过程中均会形成一套完善的保护体系.这些保护措施包括一些列组成性和诱导性生物化学过程.植物对环境胁迫的抵御可能有多条途径,对不同的环境胁迫因子的调节也可能通过相同的途径.追溯到分子水平分析,植物在受到环境胁迫的条件下,很多基因的转录水平受控于其中的顺式和反式因子.这些与环境胁迫紧密相关的基因通过不同的时间和空间表达实现对环境的应答.参与环境胁迫的基因启动子部分的顺式作用元件得到广泛的研究,很多种类的顺式作用元件参与环境胁迫因子的应答.为了进一步了解植物对不良环境的抗性机制,必须克隆与这些顺式作用元件相关的转录因子.酵母单杂交体系是克隆与顺式作用元件相关的转录因子或其结合蛋白行之有效的方法.该研究首先通过酵母单杂交体系分离与w盒类似的顺式元件相关的转录因子.这个顺式元件存在于玉米病程相关蛋白基因PRm启动子中.w盒存在很多病原菌诱导的基因启动子中,是参与病原菌应答的一类主要顺式作用元件.利用酵母单杂交体系,我们从水稻的cDNA库中分离到16个阳性克隆.通过序列测定和比较确定有3个克隆来源于同一个基因.该基因定名为RWRKY,它编码一个264个氨基酸组成的蛋白质,其中含有典型的WRKY结构和可能的核定位序列信号.通过与其他的蛋白质进行BLAST分析,证实该基因为WRKY家族中的新成员,电子杂交表明该基因存在基因组第9号染色体上,只含有1个拷贝.利用水杨酸处理幼苗,RWRKY能够诱导表达,但是其mRNA积累发生在诱导的早期,而且时间短暂,说明该蛋白可能在病害侵染早期起重要作用.
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