【摘 要】
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传统育种方法在家禽的很多重要经济性状中取得了巨大的进展,但耗时耗力。近些年来,在家禽育种中采用了分子生物技术,候选基因法是一种较常用的方法,以期找到与经济性状变异相
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传统育种方法在家禽的很多重要经济性状中取得了巨大的进展,但耗时耗力。近些年来,在家禽育种中采用了分子生物技术,候选基因法是一种较常用的方法,以期找到与经济性状变异相关的数量性状座位(quantitative trait locus, QTL)。作为重要的经济性状,体重和繁殖性状都是由繁杂的遗传和环境因素控制,所以研究家禽生长和繁殖的分子机制,可用于选择家禽重要的经济性状。本研究采用PCR-SSCP技术检测京海黄鸡促卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)β亚基基因及其受体(follicle-stimulating hormone receptor, FSHR)基因的多态性,并研究SNPs与生产性状的关系；使用RQ-PCR法研究京海黄鸡FSHβ和FSHR基因的表达谱及表达规律。主要研究结果如下：1.检测FSHβ基因的全部外显子,分析其单核苷酸多态性。结果显示FSHβ基因仅外显子3存在多态性,其中相邻的C2049T和A2050T突变,形成AA、AB和BB 3种基因型；T2341C突变形成CC、CD和DD 3种基因型；A2467C突变形成EE、EF和FF 3种基因型。关联分析结果显示12周龄体重AB基因型显著高于BB基因型(P<0.05)、EF基因型显著高于EE基因型(P<0.05)；2周龄体重CC基因型极显著高于CD基因型(P<0.01)；并且以上突变对繁殖性状无显著影响。因而可知,在生长性状方面,AB、CC和EF基因型为京海黄鸡的优势基因型,可初步推断FSHβ基因对京海黄鸡的生长有一定的促进作用。2.检测FSHR基因的外显子1和10,分析其单核苷酸多态性。结果显示FSHR基因外显子1处存在C159T突变,形成AA、AB和BB三种基因型；FSHR基因外显子10处存在C75429T的点突变,形成三种基因型CC、CD和DD。关联分析结果显示京海黄鸡2周龄体重AB基因型极显著高于BB基因型(P<0.01)、AA基因型显著高于BB基因型(P<0.05)；6周龄体重AA和AB基因型都显著高于BB基因型(P<0.05)、CD基因型显著高于CC基因型(P<0.05)；开产日龄CC和CD基因型显著早于DD基因型(P<0.05)；300日龄产蛋数AB基因型显著高于AA基因型(P<0.05)；其余差异不显著。3.对京海黄鸡FSHβ基因在不同生长阶段和组织中的表达规律进行研究。结果显示FSHβ基因在不同组织中均有一定的表达量,其中性腺和垂体的表达水平最高,在0-20周龄,FSHβ基因nRNA表达丰度在20周。FSHβ基因在公母鸡上的表达趋势是一样的,在垂体中初生时相对表达量几乎为零,到4周龄有小幅度上升的趋势,从4周龄到16周龄表达量有很大的提高,母鸡20周龄达到最高,即从4周龄到20周龄FSHβ基因的表达呈直线上升。在卵巢中初生时有少量表达,然后到4周龄降到最低之后趋于稳定。另外,4周龄和16周龄时FSHβ基因在母鸡性腺和垂体中的相对表达量均高于公鸡。4.对京海黄鸡FSHR基因在不同生长阶段和组织中的表达规律进行研究。结果显示FSHR基因在性腺表达量最高,表达丰度在初生时。在0-20周龄,FSHR基因在卵巢和睾丸中的表达,在4周龄、16周龄时都有分别下降的趋势,20周龄母鸡卵巢中FSHR基因表达量较16周龄有略微的上升,随着日龄的增长而降低。在垂体上,0-20周龄中,FSHR基因在京海黄鸡上的表达缓慢平稳的有小幅度的上升,相对来说,同一时期的公母鸡垂体中FSHR基因的表达量相仿,母鸡卵巢的表达量稍高于公鸡睾丸中的表达量。
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