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β-1，4-半乳糖基转移酶(β-1，4-galaetosyltransferase，β-1，4-GT)是一种Ⅱ型膜结合糖蛋白，通常认为是一种管家基因产物，是至今研究最多的糖基转移酶之一。β-1，4-GT利用尿苷二磷酸半乳糖(UDP-galactose，UDP-Gal)作为激活的糖供体，把半乳糖基转移到N-多糖复合物末端的N-乙酰基葡萄糖胺上。它不仅存在高尔基体膜上，而且整合于细胞质膜上，并表现不同的生物学功能。 本论文采用PCR技术，以pMGT-239／2615为模板克隆获得了β-1，4-半乳糖基转移酶(β-1，4-galactosyltransferase，β-1，4-GT)基因，测定了克隆获得的DNA片段，与从Genbank中调取的基因序列是基本一致的，只是在12位点处核苷酸T突变为G，但由于CGT和CGG均编码氨基酸Arg，所以并不影响β-1，4-GT基因的阅读框架。这种改变是否是PCR扩增引起的，尚难定论。然后，我们将β-1，4-GT基因重组到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠杆菌，用IPTG诱导表达后提取总蛋白进行Western印迹反应，检测表达结果为阳性。用IPTG诱导表达的获得β-1，4-GT与GST(谷胱甘肽转移酶)的融合蛋白，经Western blot验证与预想的一致。这是国内首次在原核中融合表达β-1，4-GT。 细胞质膜上的β-1，4-GT与精子的受精作用、胚胎形成、内分泌、神经元细胞的迁移、癌细胞的转移、表皮细胞的增殖及自体免疫性疾病等方面都有着密切的关系。可通过化学修饰或定点突变等方法来研究其结构与功能的关系。通过β-1，4-GT的定点突变改变其功能，从而以此为靶标进行药物筛选。经基因工程改良的β-1，4-GT蛋白质分子，往往具有一些新的特性，与天然β-1，4-GT相比，更适于用作筛选药物的靶标。我们的研究工作为日后对β-1，4-GT进行更广泛深入的研究奠定了基础。