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EBV属γ-1型疱疹病毒,与多种肿瘤和非肿瘤性疾病有关,常见的如霍奇金淋巴瘤(HL),伯基特淋巴瘤(BL),免疫缺陷相关性淋巴瘤、老年性EBV阳性DLBCL、鼻型-结外N/KT细胞淋巴瘤、传染性单核细胞增多症、慢性活动性EBV感染等等。EBV的致病机制极其复杂,EBV可能通过自身基因组整合到宿主细胞基因组中或者表达其基因产物直接或者间接的引起宿主细胞的异常。Ig/TCR基因重排是淋巴细胞发育成熟的一个正常生理过程。Ig/TCR基因由染色体上不连续分布的可变区(V)、高变区(D)、结合区(J)和恒定区(C)4部分基因片段组成,V、D和J区进行重排形成具有功能的Ig/TCR基因。在淋巴细胞的发育过程中,互补决定区(CDR3)遭遇抗原的识别后,免疫球蛋白重链(IgVH)发生体细胞超突变(SHM)而TCR基因家族发生选择性表达。Ig发生SHM可用于判断淋巴细胞的来源。TCR基因CDR3片段的多态性决定了TCR基因的特异性。研究发现在淋巴瘤中IgVH基因VH片段的使用具有偏向性和TCR基因家族的表达具有选择性,这提示了在肿瘤发生发展过程中,某一特定抗原或相关抗原发生了作用。EBV作为淋巴瘤相关病毒,探讨其与NHL中Ig/TCR基因分子特征及抗原决定区特征的关系可能具有重要的意义。我们采用FR3A/LJH/VLJH和FR2A/LJH/VLJH引物及巢式PCR技术对50例B-NHL(主要包括DLBCL、FL、MALT、CLL)进行Ig基因重排检测。用FR3A引物进行检测,49例为阳性,阳性率为98.0%；用FR2A引物检测,39例呈现阳性,阳性率为78.0%。用FR3A或者FR2A引物联合检测,49例阳性,阳性率98.0%。对9例NK/T-NHL(主要包括鼻型-结外NK/T细胞淋巴瘤、周围T细胞淋巴瘤、肠病型T细胞淋巴瘤)用TCRγ1和TCRγ2引物检测,9例均为阳性,阳性率为100.0%。我们用EBER原位杂交及LMP1IHC方法检测其中的39例B-NHL中EBV感染情况：EBV阳性9例,8例为老年人DLBCL。9例NK/T-NHL中7例EBER阳性,阳性率为77.8%。用荧光染料标记引物后行PCR-GeneScan,发现以FR3A/LJH/VLJH为引物检测的31例样本中,15例(43.8%)为单克隆重排,6例(19.4%)为双克隆重排,5例(16.1%)为寡克隆重排,5例(16.1%)为多克隆重排；以FR2A/LJH/VLJH为引物检测的30例样本中,21例(70.0%)为单克隆重排,2例(6.6%)为双克隆重排,3例(10.0%)为寡克隆重排,4例(13.3%)为多克隆重排。以TCRγ1为引物检测的6例样本中,2例单克隆,1例双克隆,3例多克隆。TCRγ2用引物检测的6例样本中,2例单克隆,4例多克隆。Ig/TCR序列比对分析发现,17例NHL中15例携带突变型Ig基因,主要是点突变和核苷酸的替换；且存在VH片段的偏向性使用：16例B-NHL中8例使用VH4基因家族,8例使用VH3基因家族,VH4基因家族中有4例使用VH4-34片段(25.0%),3例使用VH4-61片段(18.8%)。与我们实验室前期对17例DLBCL样本IgVH基因的研究结果相似,主要偏向VH3和VH4片段,其中有4例使用VH4-34片段(23.5%),4例使用VH4-61片段(23.5%)。提示DLBCL的发生发展可能与抗原选择相关。但与EBV的相关性仍需扩大样本检测。综上所述,本组实验NHL中EBV的感染率为42.0%,其中33例DLBCL样本中9例感染EBV,阳性率为27.3%,9例EBV阳性病例中8例为老年男人。PCR-GeneScan精确反映DNA片段的大小和数量,可在PCR-琼脂糖凝胶电泳初筛检测的基础上,进一步明确IgVH重排的类型。但淋巴瘤的诊断还需结合形态学、免疫组化及临床表现等综合分析。IgVH基因的突变状态有助于确定B细胞肿瘤的来源,本组B-NHL病例中2例DLBCL患者携带未突变IgVH基因,余为突变型,多为生发中心或生发中心后B细胞来源。且IgVH基因片段的使用具有明显的偏向性,VH4-34基因家族使用率为25.0%,VH4-61基因家族的使用率为18.8%,这提示了DLBC L的发生发展与抗原选择相关。但与EBV的相关性仍需扩大样本检测。