随着生物技术的深入研究和发展以及生物产品市场需求与利润的趋使，包括卵母细胞成熟、体外受精、受精卵的体外培养以及胚胎的冷冻保存在内的体外胚胎生产体系逐渐完善并走向商业化推广应用。体外受精技术是继人工授精、胚胎移植技术之后，家畜繁殖领域的第三次革命。牛卵母细胞体外成熟、体外受精技术的进一步研究是牛胚胎体外生产理论基础与推广应用的重点之一。本研究在总结前人研究的基础上，结合实验室自身条件，从牛卵母细胞的采取、代血清体外成熟培养、精子筛选、外源ATP促进受精精子活力等方面对牛卵母细胞体外培养技术、精子获能、体外受精及早期胚胎体外发育作了进一步研究，目的在于优化体外胚胎生产体系，探索胚胎工程技术环节中的改进方法，为理论研究积累经验，为生产实践提供技术支持。 本研究首先对不同采卵方法的效率进行了调查，结果表明，在三种采卵方法中，抽吸法效率较高，可快速采得发育较好的卵母细胞，但易造成卵巢内部卵子的露采；切割法卵子回收数量较多；抽吸加切割法不仅回收数量多，而且可以将不同质量的卵子分离，但其操作较为繁琐。抽吸法和切割法适用于卵巢来源充足的情况下，抽吸加切割法适合于在卵巢来源有限时使用。 在牛卵母细胞体外成熟培养过程中，本研究在同一种成熟培养液中，分别添加用0.3％PVP和10％FBS，检验PVP代血清培养是否可行。结果显示，0.3％PVP处理组与10％FBS组卵母细胞的成熟率分别为70.08％和79.75％，二者差异不显著(P＞0.05)。代血清培养的受精率与有血清培养的受精率(50.78％和49.19％)及桑囊率(22.45％和20.88％)差异并不显著(P＞0.05)。这表明PVP代替血清进行牛卵母细胞体外成熟培养是可行的，但是仍有待于进一步完善和加强。 精子的筛选是体外受精过程中的重要步骤之一。本研究将两种常用的精子筛选方法，即Swim-up法与Percoll法，进行了筛选效果对比。结果显示，用Swim-up和Percoll法处理牛冷冻精液后，牛卵母细胞受精率分别为52.14％和54.29％，二者无显著差异(P＞0.05)。Percoll法更加简便、快速，应是今后应用的首选方法。 最后，本研究用ATP对解冻精液进行处理与添加同体积0.9％NaCl处理精液受精组对比，探讨了适当浓度外源ATP处理牛精子对精子活力和受精率是否有提高和促进作用。结果显示，添加ATP处理组的精卵受精率(55.74％)高于添加同体积0.9％NaCl处理组的受精率(51.29％)，且差异显著(P＜0.05)；卵裂率分