本研究旨在制备艾塞那肽长效注射微球,并提高微球制备及质量评价中艾塞那肽的稳定性。本课题的研究内容如下:(1)考察外界环境如pH、温度、离子强度、糖类化合物及金属离子等对原料药艾塞那肽稳定性的影响,并建立稳定剂(如糖类化合物、金属离子)的评价方法;(2)建立艾塞那肽含量、微球载药量测定和体外评价的方法;(3)制备艾塞那肽微球,并考察工艺、处方与添加剂等对微球制备的影响。本研究中主要采用高效液相色谱法(HPLC)测定艾塞那肽的含量,傅氏转换红外线光谱分析法(FTIR)和圆二色谱法(CD)分析艾塞那肽的结构信息,电位测定法测定艾塞那肽表面电位,并研究艾塞那肽在不同条件下的稳定性;采用复乳-液中乳化法与膜乳化法制备微球,并考察辅料类型、组成、添加剂及工艺等对艾塞那肽微球制备的影响。研究表明,pH偏中性、温度升高及离子强度增加会降低艾塞那肽的稳定性,而添加海藻糖、蔗糖及Zn2+等可提高其稳定性;通过电位测定仪测定艾塞那肽在添加不同金属离子时表面电位的变化,发现金属离子的浓度越高、所带电荷越多,对艾塞那肽表面电位的影响越大;采用W/O/W法制备艾塞那肽微球,适当减小内水相体积、提高油相浓度,可提高微球的载药量;适当增加外水相浓度、渗透压,也可提高微球载药量;在油相中添加Span80可优化微球的释药行为(减小突释,提高累积释放量)。本研究最终建立了载药量4.37%、24h突释1.39%、工艺简单且质量可控的艾塞那肽微球的制备方法。本研究中所建立的多肽稳定剂的评价方法与微球释药行为的优化方法,为多肽微球的研究提供了一定的参考。