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口腔微生态在龋病的发病过程中起着至关重要的作用。但是目前基于口腔龋病微生态的测序研究通常局限于属水平。本研究利用Pacbio单分子测序技术,揭示了 口腔龋病微生态精确到种水平以上的菌群特征。筛选出了在龋病的发病过程中重要的可疑致龋细菌,通过体外实验验证了其黏附和产酸作用。通过单细菌全基因组测序,揭示了该细菌的全基因组序列,预测了其致龋机制及相关基因。方法:采集健康人群和龋病人群的口腔唾液,提取全基因组DNA后采用Pacbio单分子测序技术对16S rRNA基因的全长进行测序,分析微生态菌群结构。加入龋病易感人群进行对照,筛选出新的可疑致龋菌。选择体外验证具有致龋能力的细菌,提取基因组DNA,利用illumina Hiseq测序技术进行全基因组测序,并进行编码基因的筛选和功能注释。结果:1龋病人群口腔微生态龋病人群之间口腔微生态菌群结构差异较健康人群更大。龋病人群口腔微生态的优势菌门是厚壁菌门,优势菌属有:乳杆菌属,艰难杆菌属,戴阿利斯特杆菌属等,优势菌种有非典型韦荣菌,变异链球菌,表兄链球菌,变黑普雷沃菌,发酵乳杆菌等。通过加入龋病易感人群进行分析,Prevotella histicola,Veillonella denticariosi,Filifactor alocis等菌种的丰度在龋病易感人群中升高。2可疑致龋菌体外致龋能力验证Prevotella histicola在体外实验中展现出较强的黏附、产酸能力。在菌液中加入牙釉质片培养,在1,3,5,7天后,釉质表面被脱矿,显微硬度下降,形貌发生改变。3 Prevotella histicola全基因组测序通过全基因组测序,测得编码基因2334个。通过基因注释,预测Prevotella histicola通过发酵葡萄糖产生醋酸以及乳酸,黏附作用依靠细胞表面的脂多糖、荚膜等结构,并具有较为活跃的密度感应系统。结论:1龋病人群和健康人群的口腔微生态存在巨大差异,龋病易感人群的口腔微生态介于二者之间,结果提示Prevotella histicola,Veillonella denticariosi,Filifactor alocis等菌种在龋病的早期发生过程起到重要作用。2细菌Prevotella histicola具有较强的致龋潜能。3测序获得Prevotella histicola细菌的全基因组图谱以及功能基因注释。