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目的建立兔Perthes病模型并通过观察Perthes病程中股骨头局部VEGF表达的变化探讨VEGF在儿童股骨头坏死修复重建方面的作用。采用三种不同的手术方法(髓芯减压、滑膜切除和自体松质骨移植)治疗Perthes病模型,通过观察并比较VGEF表达的变化从实验角度上对三种手术方法的治疗效果作一简单评价。方法(1)3月龄新西兰大白兔24只,取16只兔作为实验组,手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型。于术后1、2、4及8周分别处死动物,取出股骨头,行大体观察、X线片、组织学、VEGF免疫组织化学染色和VEGFmRNA原位杂交观察。(2)3月龄新西兰大白兔36只,随机均分为4组,每组9只。A组:Perthes病模型组,B组:Perthers病模型+髓芯减压组,C组:Perthes病模型+滑膜切除组,D组:Perthes病模型+自体松质骨植入组。手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型。模型制作后2周分别对B、C、D组采用上述不同手术方法加以治疗,各组于制模后4、6、8周(即治疗后的2、4、6周)分别处死3只动物,取出股骨头,进行观察。结果(1)Perthes动物模型均制备成功。大体观察:对照组各时间点股骨头未见坏死改变。实验组股骨头随时间延长逐渐粗糙、失去光泽,大小变小,甚至可见塌陷。X线片观察:术后4、8周,实验组股骨头较对照组密度增高。组织学观察:对照组各时间点HE染色均未见股骨头坏死及修复改变。实验组术后4周、8周可见血管及肉芽组织侵入,新骨形成,参与修复。免疫组织化学:对照组股骨头骺软骨中,肥大区表现出较高的VEGF免疫反应性(immunoreactivity,VEGF-IR),而增殖区VEGF-IR却表现较低水平。术后1周,实验组股骨头增殖区VEGF阳性细胞率开始高于对照组,实验组股骨头肥大区VEGF阳性细胞率明显减少。术后8周,实验组股骨头整个骺软骨区都表现VEGF-IR,增殖区VEGF阳性细胞率较对照组明显增加。术后8周,坏死股骨头软骨内骨化中心修复重建,肥大区VEGF阳性细胞率较正常接近。术后1、2、4、8周,实验组骺软骨增殖区VEGF阳性细胞率与对照组比较均有统计学意义(p﹤0.01,α=0.05);术后1、2、4周,实验组骺软骨肥大区VEGF阳性细胞率与对照组比较均有统计学意义(p﹤0.01,α=0.05)。原位杂交:结果与免疫组化相近。缺血坏死后,实验组肥大区VEGF mRNA表达丧失,增殖区VEGF mRNA表达升高。软骨内骨化中心修复重建后,实验组可见新形成的肥大区重新表达VEGF mRNA。(2)B、C组各时间点VEGF-IR与A组无明显差异。D组4周可见股骨头增殖区和肥大区VEGF-IR较A组升高;6周与4周观察类似;8周股骨头整个骺软骨区都表现VEGF-IR,增殖区VEGF阳性细胞率较A组增加。股骨头软骨内骨化中心修复重建,肥大区VEGF阳性细胞率较A组增加。D组各时间点增殖区与肥大区VEGF阳性细胞率高于其他各组,相比有统计学意义(P﹤0.05,α=0.05)结论(1)采用手术切断幼兔股骨头血供的方法制作出的Perthes病模型,在X线及病理方面均表现出与Perthes病相似的特点.(2)VEGF在坏死股骨头骺软骨促进血管发生,软骨内骨化中心的修复重建方面起关键的调节作用,为Perthes病的治疗提供了一定的基础。(3)选取三种不同的手术方法(髓芯减压、滑膜切除和自体松质骨移植)治疗Perthes病模型,通过观察并比较VGEF表达的变化,结果从实验角度上表明自体松质骨移植手术治疗Perthes病模型中,VEGF的表达明显高于其他两组。